Ua puni ʻo SPE no nā makahiki he nui, a no ke kumu maikaʻi.Ke makemake nei nā ʻepekema e wehe i nā ʻāpana hope mai kā lākou mau laʻana, ke alo nei lākou i ka paʻakikī o ka hana ʻana me ka ʻole o ka hōʻemi ʻana i ko lākou hiki ke hoʻoholo pololei a pololei i ka hele ʻana a me ka nui o kā lākou pūhui hoihoi.ʻO SPE kekahi ʻenehana i hoʻohana pinepine ʻia e ka poʻe ʻepekema e kōkua i ka hoʻomākaukau ʻana i kā lākou mau laʻana no ka mea kani koʻikoʻi i hoʻohana ʻia no ka loiloi quantitative.Paʻa ʻo SPE, hana no nā ʻano laʻana like ʻole, a ke hoʻomau ʻia nei nā huahana SPE hou a me nā ʻano hana.ʻO ka naʻau o ka hoʻomohala ʻana i ia mau ʻano ka mahalo ʻoiai ʻaʻole ʻike ʻia ka huaʻōlelo "chromatography" ma ka inoa o ka ʻenehana, ʻo SPE naʻe he ʻano o ka hoʻokaʻawale chromatographic.

SPE: The Silent Chromatography

Aia kekahi ʻōlelo kahiko, “inā hāʻule ka lāʻau i loko o ka ululāʻau, a ʻaʻohe mea e lohe ai, kani mau nō ia?”Hoʻomanaʻo mai kēlā ʻōlelo iā SPE.He mea ʻē paha ka ʻōlelo ʻana, akā ke noʻonoʻo mākou iā SPE, lilo ka nīnau "inā he kaʻawale a ʻaʻohe mea ʻike ma laila e hoʻopaʻa ai, ua hana maoli anei ka chromatography?"Ma ka hihia o SPE, ʻo ka pane he "ʻae!"Ke hoʻomohala a hoʻoponopono paha i kahi ala SPE, hiki ke kōkua nui i ka hoʻomanaʻo ʻana he chromatography wale nō ka SPE me ka ʻole o ka chromatogram.Ke noʻonoʻo ʻoe, ʻaʻole anei ʻo Mikhail Tsvet, i ʻike ʻia ʻo "ka makua o ka chromatography," i hana i ka mea a mākou e kapa ai ʻo "SPE" i kēia lā?I kona hoʻokaʻawale ʻana i kāna hui ʻana o nā puaʻa mea kanu ma ka ʻae ʻana i ka ʻumekaumaha e lawe iā lākou, i hoʻoheheʻe ʻia i loko o kahi mea hoʻoheheʻe, ma o kahi moena o ka paʻakai lepo, ʻokoʻa anei ia ma mua o ke ʻano SPE hou?

Ka hoomaopopo ana i kou laana

No ka mea ua hoʻokumu ʻia ka SPE ma nā loina chromatographic, ma ka puʻuwai o kēlā me kēia ʻano SPE maikaʻi ka pilina ma waena o nā analytes, ka matrix, ka pae paʻa (ka SPE sorbent), a me ka pae kelepona (nā mea hoʻoheheʻe i hoʻohana ʻia e holoi a elute i ka hāpana) .

ʻO ka hoʻomaopopo ʻana i ke ʻano o kāu laʻana e like me ka hiki ke wahi maikaʻi loa e hoʻomaka ai inā pono ʻoe e hoʻomohala a hoʻoponopono paha i kahi ala SPE.No ka pale ʻana i ka hoʻāʻo a me ka hewa ʻole i ka wā o ka hoʻomohala ʻana i ke ʻano, kōkua nui ka wehewehe ʻana i nā waiwai kino a me nā mea kemika o kāu mau analytes a me ka matrix.Ke ʻike ʻoe e pili ana i kāu laʻana, e ʻoi aku ʻoe i kahi kūlana maikaʻi e hoʻohālikelike i kēlā hāpana me kahi huahana SPE kūpono.No ka laʻana, ʻo ka ʻike ʻana i ka polarity pili o nā analytes i hoʻohālikelike ʻia i kekahi i kekahi a hiki i ka matrix ke kōkua iā ʻoe e hoʻoholo inā hoʻohana ka polarity e hoʻokaʻawale i nā analytes mai ka matrix ke ala kūpono.ʻO ka ʻike inā he kūʻokoʻa kāu analytes a i ʻole hiki ke noho ma nā mokuʻāina i hoʻopaʻa ʻia hiki ke kōkua iā ʻoe e kuhikuhi iā ʻoe i nā huahana SPE i loea i ka mālama ʻana a i ʻole eluting neutrals, hoʻopiʻi maikaʻi, a i ʻole nā ​​​​mea hoʻopiʻi ʻino.Hōʻike kēia mau manaʻo ʻelua i ʻelua o nā waiwai analyte i hoʻohana pinepine ʻia e leverage i ka wā e hoʻomohala ai i nā ala SPE a koho i nā huahana SPE.Inā hiki iā ʻoe ke wehewehe i kāu analytes a me nā ʻāpana matrix koʻikoʻi i kēia mau huaʻōlelo, ke hele nei ʻoe e koho i kahi ala maikaʻi no kāu hoʻomohala ʻana i ke ʻano SPE.

Hoʻokaʻawale ʻia e ka Affinity

ʻO nā loina e wehewehe ana i ka hoʻokaʻawale ʻana i loko o kahi kolamu LC, no ka laʻana, ke pāʻani nei i kahi kaʻawale SPE.ʻO ke kumu o ka hoʻokaʻawale chromatographic ke hoʻokumu nei i kahi ʻōnaehana like ʻole o ka launa pū ʻana ma waena o nā ʻāpana o ka hāpana a me nā ʻāpana ʻelua i loaʻa i ke kolamu a i ʻole ka pahu SPE, ka pae kelepona a me ka pae paʻa.

ʻO kekahi o nā ʻanuʻu mua i ka ʻoluʻolu me ka hoʻomohala ʻana i ke ʻano SPE, ʻo ia ka ʻike ʻana i nā ʻano pilina ʻelua i ʻike pinepine ʻia ma ka hoʻokaʻawale ʻana o SPE: polarity a/a i ʻole ke kūlana uku.

Polarity

Inā ʻoe e hoʻohana i ka polarity e hoʻomaʻemaʻe i kāu laʻana, ʻo kekahi o nā koho mua āu e hana ai ʻo ka hoʻoholo ʻana i ke ʻano o ka "mode".ʻOi aku ka maikaʻi o ka hana ʻana me kahi ʻano polar SPE a me kahi ʻano kaʻahele nonpolar (ʻo ia hoʻi ke ʻano maʻamau) a i ʻole ka ʻaoʻao ʻē aʻe, kahi ʻano SPE ʻano nonpolar i hui pū ʻia me kahi ʻano polar mobile (ʻo ia hoʻi ke ʻano hoʻohuli, kapa ʻia no ka mea ʻo ia ka ʻaoʻao. o ka "mode maʻamau" i hoʻokumu mua ʻia).

Ke ʻimi nei ʻoe i nā huahana SPE, e ʻike ʻoe aia nā ʻāpana SPE i nā ʻano polarities.Eia kekahi, ʻo ke koho ʻana i ka solvent phase mobile e hāʻawi i kahi ākea o nā polarities, pinepine hiki ke hoʻohana ʻia ma o ka hoʻohana ʻana i nā hui o nā solvents, buffers, a i ʻole nā ​​​​mea hoʻohui ʻē aʻe.Loaʻa ka nui o ka finesse i ka wā e hoʻohana ai i nā ʻokoʻa polarity e like me ke ʻano koʻikoʻi e hoʻohana ai e hoʻokaʻawale i kāu mau analytes mai nā interferences matrix (a i ʻole kekahi i kekahi).

E hoʻomanaʻo wale i ka ʻōlelo kemika kahiko "like dissolves like" ke noʻonoʻo nei ʻoe i ka polarity ma ke ʻano he mea hoʻokele kaʻawale.ʻOi aku ka like o ka pūhui i ka polarity o kahi pae paʻa a paʻa paha, ʻoi aku ka ikaika o ka launa pū ʻana.ʻO ka hoʻopili ikaika ʻana me ka pae paʻa e alakaʻi i ka hoʻopaʻa ʻana i ka ʻoihana SPE.ʻO nā pilina ikaika me ka māhele paʻa e alakaʻi i ka liʻiliʻi o ka paʻa a me ka elution mua.

Mokuʻāina ʻauhau

Inā noho mau nā analytes o ka ukupanee i loko o kahi moku'āina i hoʻopiʻi ʻia a i ʻole hiki ke hoʻokomo ʻia i loko o kahi kūlana i hoʻopiʻi ʻia e nā kūlana o ka hopena i hoʻoheheʻe ʻia i loko (e laʻa i ka pH), a laila kekahi ala ikaika e hoʻokaʻawale iā lākou mai ka matrix (a i ʻole kēlā me kēia. ʻē aʻe) ma o ka hoʻohana ʻana i ka media SPE hiki ke huki iā lākou me kā lākou uku ponoʻī.

I kēia hihia, pili nā lula hukihuki electrostatic maʻamau.ʻAʻole like me ka hoʻokaʻawale ʻana i hilinaʻi i nā hiʻohiʻona polarity a me ke ʻano hoʻohālike "like dissolves like" o ka launa pū ʻana, hoʻohana ʻia nā pilina mokuʻāina i hoʻopaʻa ʻia ma ke ʻano o ka "hoʻohuli kū'ē."No ka laʻana, loaʻa paha iā ʻoe kahi media SPE i loaʻa ka uku maikaʻi ma kona ʻili.No ke kaulike ʻana i kēlā ʻili i hoʻopaʻi maikaʻi ʻia, aia kekahi ʻano i hoʻopaʻa ʻole ʻia (he anion) i hoʻopaʻa mua ʻia iā ia.Inā hoʻokomo ʻia kāu analyte i hoʻopiʻi maikaʻi ʻole ʻia i loko o ka ʻōnaehana, hiki iā ia ke hoʻoneʻe i ka anion i hoʻopaʻa mua ʻia a launa pū me ka ʻili SPE i hoʻopiʻi maikaʻi ʻia.Loaʻa kēia i ka paʻa ʻana o ka analyte ma ka pae SPE.Ua kapa ʻia kēia hoʻololi ʻana o nā anion "Anion Exchange" a he hoʻokahi wale nō hiʻohiʻona o ka māhele ākea o nā huahana SPE "Ion Exchange".Ma kēia laʻana, loaʻa i nā ʻano mea i hoʻopaʻi maikaʻi ʻia ka manaʻo ikaika e noho i ka pae paʻa a ʻaʻole e launa pū me ka ʻili SPE i hoʻopiʻi maikaʻi ʻia, no laila ʻaʻole lākou e paʻa.A inā ʻaʻole loaʻa nā ʻano ʻē aʻe o ka ʻili SPE i ka hoʻohui ʻana i kona mau waiwai hoʻololi ion, e mālama ʻia nā ʻano kūʻokoʻa (ʻoiai, aia nā huahana SPE i hui pū ʻia, e ʻae iā ʻoe e hoʻohana i ka hoʻololi ʻana i ka ion a me nā ʻano hana hoʻopaʻa ʻana i ke ʻano hoʻololi i ka ʻano SPE like. ).

ʻO kahi ʻokoʻa koʻikoʻi e hoʻomanaʻo ʻia i ka wā e hoʻohana ai i nā mīkini hoʻololi ion ke ʻano o ke kūlana hoʻopiʻi o ka analyte.Inā hoʻopiʻi mau ʻia ka analyte, me ka nānā ʻole i ka pH o ka hopena i loko, ua manaʻo ʻia he ʻano "ikaika".Inā hoʻopiʻi wale ʻia ka analyte ma lalo o kekahi mau kūlana pH, manaʻo ʻia he ʻano "nāwaliwali".He ʻano koʻikoʻi kēlā e hoʻomaopopo ai e pili ana i kāu mau analytes no ka mea e hoʻoholo ai i ke ʻano o ka media SPE e hoʻohana ai.Ma nā ʻōlelo maʻamau, ʻo ka noʻonoʻo ʻana e pili ana i nā mea kūʻē i ka hele pū ʻana e kōkua mai ʻaneʻi.Pono e hoʻohui i kahi mea hoʻololi ion hoʻololi SPE sorbent me kahi ʻano "ikaika" a me kahi sorbent hoʻololi ion ikaika me kahi analyte "nawaliwali".