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स्तंभ/अलवणीकरण प्लेट सेफैडेक्स जी-25 उपयोग के लिए निर्देश

तकनीकी डाटा

स्तंभ/अलवणीकरण प्लेट सेफैडेक्स जी-25 उपयोग के लिए निर्देश

उत्पाद परिचय

डेक्सट्रान जी-25 विलवणीकरण स्तंभ/प्लेट मुख्य रूप से नेटवर्क संरचना के साथ डेक्सट्रान के अपने जेल बहुलक यौगिकों में आणविक छलनी फ़ंक्शन का उपयोग करता है। अलग किए गए पदार्थों के विभिन्न आणविक भार आकारों के कारण, जब अलग किए गए पदार्थ जी-25 जेल से गुजरते हैं, तो बड़े आणविक भार वाले पदार्थ (जैसे प्रोटीन) जेल कणों के बाहर अवरुद्ध हो जाते हैं और जेल कणों के बीच के अंतराल से बाहर निकल जाते हैं, प्रक्रिया छोटी होती है और गति की गति तेज़ होती है, इसलिए बड़े आणविक भार वाले पदार्थ पहले स्तंभ/प्लेट से बाहर निकलेंगे। एक छोटे आणविक भार वाले पदार्थ (जैसे लवण) जेल कणों के माइक्रोपोर में प्रवेश कर सकते हैं, प्रक्रिया लंबी और धीमी होती है, और उच्च आणविक भार वाले पदार्थों को जेल स्तंभ/प्लेट से बाहर निकलने में अधिक समय लगता है, इसलिए वे अंततः धुल जाते हैं, और इस प्रकार पदार्थ अलग हो जाते हैं।

सेफाडेक्स जी-25 श्रृंखला मीडिया के पैरामीटर तालिका में दिखाए गए हैं

परियोजना पैरामीट्रिक
विशेषताएँ गंदा सफेद जेल
औसत कण आकार (शुष्क) 150±100μm 92.8
कण आकार वितरण (45-165μm)% ≥80
स्प्लिट रेंज (पुर्तगाली) 100-5000
पृथक्करण सीमा (ग्लोब्युलिन) 1000-5000
जल अनुपात (एमएल गीला गोंद/ग्राम सूखा पाउडर) 2.3-2.7
रैखिक प्रवाह दर(0.3MPA, सेमी/घंटा) 697.1
अधिकतम प्रवाह दर (सेमी/घंटा) 150
संरक्षण समाधान 0.2M NaAc 20 प्रतिशत इथेनॉल
जमा करने की अवस्था 4'सी-30'सी

मॉडल संख्या G प्रति ग्राम जेल में अवशोषित जल की मात्रा को इंगित करती है, उदाहरण के लिए, G-25 जेल माध्यम यह इंगित करता है कि शुष्क जेल के प्रति ग्राम में 2.5 मिली लीटर जल अवशोषित होता है, अर्थात जेल विस्तार गुणांक, जो जेल कणों के छिद्र का आकार भी है।

सेफाडेक्स जी-25 श्रृंखला क्रोमैटोग्राफी मीडिया का व्यापक रूप से बफर एक्सचेंज, प्रोटीन विलवणीकरण, विभिन्न आणविक भार के प्रोटीनों के पृथक्करण आदि के लिए उपयोग किया जाता है। विलवणीकरण और बफरिंग के लिए अधिकतम नमूना मात्रा कॉलम बेड मात्रा का 30% तक हो सकती है।

कार्यप्रवाह

1. स्पीकर/टैबलेट को संतुलित करना: जब प्रीलोडेड G-25 सेफैडेक्स वाला स्पीकर/टैबलेट सीधा खड़ा हो जाए, तो G-25 डिसॉल्टिंग कॉलम/टैबलेट को कॉलम लेयर के आयतन से 5 से 10 गुना अधिक बफर से संतुलित करें। (नोट: बफर वह बफर है जिसे प्रतिस्थापित किया जाना है, जैसे PBS, विआयनीकृत जल, आदि; सावधान रहें, प्रवाह दर को नियंत्रित करें)

2. नमूनाकरण: जेल कॉलम/प्लेट बफर के साथ संतुलित होने के बाद, सैंपल को पिपेट करें और धीरे-धीरे इसे जेल की सतह पर छलनी में डालें, नीचे की टोपी खोलें और सैंपल को धीरे-धीरे जेल में तब तक प्रवेश करने दें जब तक कि यह जेल के साथ फ्लश न हो जाए। (नोट: नीचे का सैंपल वॉल्यूम आमतौर पर कॉलम लेयर वॉल्यूम का 10-30% होता है, सैंपल चिपचिपापन बहुत अधिक नहीं होना चाहिए, अन्यथा G25 ग्रंथि का सेवा जीवन छोटा हो जाएगा)।

3. निक्षालन: नमूना पूरी तरह से जेल में प्रवेश करने के बाद निक्षालन बफर के साथ निक्षालन किया जाता है। (नोट: अनुशंसित नमूना प्रवाह दर लगभग 1-2 मिली/मिनट है। निक्षालन मात्रा आमतौर पर नमूना मात्रा से 1.2-2.0 गुना होती है)।

4. शुद्धिकरण और पुनर्जनन: कुछ प्रोटीन खारे घोल में विकृत हो जाते हैं, इसलिए स्तंभ बिस्तर को 0.2 एम NaOH या किसी अन्य गैर-आयनिक डिटर्जेंट से धोकर इन प्रोटीनों को शुद्ध करना आवश्यक हो सकता है।

5. भंडारण: प्रयोग के बाद, 0.02% सोडियम एजाइड घोल या 20% इथेनॉल घोल में भंडारण करें।