Data Teknis
Petunjuk penggunaan kolom/pelat desalinasi sephadex g-25
Pengenalan Produk
Kolom/pelat desalinasi Dextran G-25 terutama menggunakan fungsi saringan molekuler dalam senyawa polimer gel dekstran dengan struktur jaringan. Karena ukuran berat molekul yang berbeda dari zat yang dipisahkan, ketika zat yang dipisahkan melewati gel G-25, zat dengan berat molekul besar (seperti protein) diblokir di luar partikel gel dan mengalir keluar melalui celah antara partikel gel, prosesnya singkat dan kecepatan gerakannya cepat, sehingga zat dengan berat molekul besar akan mengalir keluar dari kolom/pelat terlebih dahulu. Zat dengan berat molekul kecil (misalnya garam) dapat menembus ke dalam mikropori partikel gel, prosesnya lama dan lambat, dan zat dengan berat molekul lebih tinggi membutuhkan waktu lebih lama untuk mengalir keluar dari kolom/pelat gel, sehingga akhirnya dicuci, dan dengan demikian zat tersebut dipisahkan.
Parameter media seri Sephadex G-25 ditunjukkan pada tabel
| Proyek | parametrik |
| Fitur | Gel Putih Kotor |
| Ukuran partikel rata-rata (kering) | 150±100μm 92,8 |
| Distribusi ukuran partikel (45-165μm)% | ≥80 |
| Rentang Terpisah (Portugis) | 100-5000 |
| Rentang Pemisahan (Globulin) | 1000-5000 |
| Rasio air (ml lem basah/g bubuk kering) | 2.3-2.7 |
| Laju Aliran Linier (0,3MPA, cm/jam) | 697.1 |
| Laju Aliran Maksimum (cm/jam) | 150 |
| Solusi pelestarian | 0,2M NaAc 20 persen etanol |
| kondisi penyimpanan | 4 derajat Celcius - 30 derajat Celcius |
Nomor model G menunjukkan jumlah air yang diserap per gram gel, misalnya, media gel G-25 menunjukkan bahwa 2,5 ml air diserap per gram gel kering, yaitu koefisien ekspansi gel, yang juga merupakan ukuran pori partikel gel.
Media kromatografi seri Sephadex G-25 banyak digunakan untuk pertukaran buffer, desalinasi protein, pemisahan protein dengan berat molekul berbeda, dll. Volume sampel maksimum untuk desalinasi dan buffering dapat mencapai 30% dari volume kolom.
Alur kerja
1. Menyeimbangkan Speaker/Tablet: Setelah speaker/tablet dengan G-25 Sefadex yang telah dimuat sebelumnya berada dalam posisi tegak, seimbangkan kolom/tablet desalinasi G-25 dengan buffer 5 hingga 10 kali volume lapisan kolom. (Catatan: Buffer adalah buffer yang diinginkan untuk diganti, misalnya PBS, air deionisasi, dll.; berhati-hatilah, kendalikan laju aliran)
2. Pengambilan sampel: Setelah kolom/pelat gel seimbang dengan buffer, pipet sampel dan tambahkan perlahan ke saringan pada permukaan gel, buka tutup bawah dan biarkan sampel masuk perlahan ke gel hingga rata dengan gel. (Catatan: Volume sampel di bagian bawah biasanya 10-30% dari volume lapisan kolom, viskositas sampel tidak boleh terlalu tinggi, jika tidak, masa pakai gland G25 akan dipersingkat).
3. Elusi: Sampel dielusi dengan buffer elusi setelah sepenuhnya masuk ke dalam gel. (Catatan: Laju aliran sampel yang disarankan adalah sekitar 1-2 ml/menit. Volume elusi biasanya 1,2-2,0 kali volume sampel).
4. Pemurnian dan regenerasi: Beberapa protein didenaturasi dalam larutan garam, jadi mungkin perlu memurnikan protein ini dengan mencuci dasar kolom dengan NaOH 0,2 M atau deterjen non-ionik lainnya.
5. Penyimpanan: Setelah percobaan, simpan dalam larutan natrium azida 0,02% atau larutan etanol 20%.