Kjarnsýruútdráttarsúluútdráttaraðferð og meginregla

Kjarnsýra skiptist í deoxýríbónsýru (DNA) og ríbónsýru (RNA), þar á meðal má skipta RNA í ríbósómal RNA (rRNA), boðbera RNA (mRNA) og flutnings RNA (tRNA) eftir mismunandi hlutverkum.

DNA er aðallega einbeitt í kjarna, hvatberum og grænukornum en RNA dreifist aðallega í umfryminu.

Vegna þess að púrínbasar og pýrimídínbasar hafa samtengd tvítengi í kjarnsýrum hafa kjarnsýrur einkenni útfjólubláa frásogs.Útfjólubláa frásog DNA natríumsölta er um 260nm og frásog þess er gefið upp sem A260 og það er við frásogsbotninn við 230nm, þannig að hægt er að nota útfjólubláa litrófsspeglun.Kjarnsýrur eru magnbundnar og eigindlegar ákvarðaðar með ljósmæli.

Kjarnsýrur eru amfólýtar, sem jafngilda fjölsýrum.Kjarnsýrur er hægt að sundra í anjónir með því að nota hlutlausa eða basíska stuðpúða og setja í rafsvið til að fara í átt að forskautinu.Þetta er meginreglan um rafskaut.

Kjarnsýruútdráttarsúluútdráttaraðferð og meginregla

Kjarnsýruútdráttur og hreinsun meginreglur og kröfur

1. Tryggja heilleika kjarnsýru frumbyggingar

2. Útrýma mengun annarra sameinda (svo sem að útiloka RNA-truflun við útdrátt DNA)

3. Engin lífræn leysiefni ættu að vera og hár styrkur málmjóna sem hindra ensím í kjarnsýrusýnum

4. Draga úr stórsameindaefnum eins og próteinum, fjölsykrum og lípíðum eins og hægt er

Kjarnsýruútdráttur og hreinsunaraðferð

1. Fenól/klóróform útdráttaraðferð

Það var fundið upp árið 1956. Eftir að frumubrotinn vökvi eða vefjajafnvægi hefur verið meðhöndlaður með fenóli/klóróformi, eru kjarnsýruþættirnir, aðallega DNA, leystir upp í vatnsfasanum, lípíð eru aðallega í lífræna fasanum og prótein eru staðsett á milli þeirra tveggja áföngum.

2. Áfengisúrkoma

Etanól getur útrýmt vökvalagi kjarnsýru og afhjúpað neikvætt hlaðna fosfathópinn og jákvætt hlaðnar jónir eins og NA﹢ geta sameinast fosfathópnum til að mynda botnfall.

3. Litskiljunarsúluaðferð

Í gegnum sérstaka kísil-undirstaða aðsogsefnið er hægt að aðsogga DNA sérstaklega, á meðan RNA og prótein geta farið vel í gegnum, og síðan notað hátt salt og lágt pH til að binda kjarnsýru, og skolað út með lágu salti og hátt pH til að aðskilja og hreinsa kjarna. sýru.

4. Hita sprunga alkalí aðferð

Basísk útdráttur notar aðallega staðfræðilegan mun á samgildum lokuðum hringlaga plasmíðum og línulegu litningi til að aðskilja þau.Við basískar aðstæður eru náttúruleg prótein leysanleg.

5. Boiling pyrolysis aðferð

DNA lausnin er hitameðhöndluð til að nýta eiginleika línulegra DNA sameinda til að aðskilja DNA búta frá botnfalli sem myndast af náttúrupróteinum og frumurusli með skilvindu.

6. Nanósegulmagnar perlur aðferð

Með því að nota nanótækni til að bæta og breyta yfirborði superparamagnetic nanóagna eru ofurparamagnetic kísiloxíð nanósegulmagnaðir perlur útbúnar.Segulperlurnar geta sérstaklega þekkt og á skilvirkan hátt tengst kjarnsýrusameindum á smásjá viðmóti.Með því að nota ofurparasegulfræðilega eiginleika kísilnanospheres, undir verkun Chaotropic sölta (guanidínhýdróklóríðs, guanidínísóþíósýanats, osfrv.) og ytra segulsviðs, voru DNA og RNA einangruð úr blóði, dýravef, mat, sjúkdómsvaldandi örverum og öðrum sýnum.


Pósttími: 18. mars 2022