ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਵਾਲਾ ਕਾਲਮ ਕੱਢਣ ਦਾ ਤਰੀਕਾ ਅਤੇ ਸਿਧਾਂਤ

ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਡੀਓਕਸੀਰੀਬੋਨਿਊਕਲਿਕ ਐਸਿਡ (ਡੀਐਨਏ) ਅਤੇ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲਿਕ ਐਸਿਡ (ਆਰਐਨਏ) ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਾਰਜਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਰਿਬੋਸੋਮਲ ਆਰਐਨਏ (ਆਰਆਰਐਨਏ), ਮੈਸੇਂਜਰ ਆਰਐਨਏ (ਐਮਆਰਐਨਏ) ਅਤੇ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਆਰਐਨਏ (ਟੀਆਰਐਨਏ) ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਡੀਐਨਏ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਿਊਕਲੀਅਸ, ਮਾਈਟੋਕੌਂਡਰੀਆ ਅਤੇ ਕਲੋਰੋਪਲਾਸਟਾਂ ਵਿੱਚ ਕੇਂਦਰਿਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

ਕਿਉਂਕਿ ਪਿਊਰੀਨ ਬੇਸ ਅਤੇ ਪਾਈਰੀਮੀਡੀਨ ਬੇਸਾਂ ਨੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਯੁਕਤ ਡਬਲ ਬਾਂਡ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਵਿੱਚ ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਸਮਾਈ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ।ਡੀਐਨਏ ਸੋਡੀਅਮ ਲੂਣ ਦੀ ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਸਮਾਈ ਲਗਭਗ 260nm ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਦੀ ਸਮਾਈ ਨੂੰ A260 ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ 230nm 'ਤੇ ਸੋਖਣ ਵਾਲੀ ਗਰੰਟ 'ਤੇ ਹੈ, ਇਸਲਈ ਅਲਟਰਾਵਾਇਲਟ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਸਕੋਪੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਇੱਕ ਲੂਮਿਨੋਮੀਟਰ ਦੁਆਰਾ ਗਿਣਾਤਮਕ ਅਤੇ ਗੁਣਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।

ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਐਮਫੋਲਾਈਟਸ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਪੋਲੀਐਸਿਡ ਦੇ ਬਰਾਬਰ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡਾਂ ਨੂੰ ਨਿਊਟਰਲ ਜਾਂ ਖਾਰੀ ਬਫਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਐਨਾਇਨਾਂ ਵਿੱਚ ਵੰਡਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਐਨੋਡ ਵੱਲ ਜਾਣ ਲਈ ਇੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ ਹੈ।

ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਵਾਲਾ ਕਾਲਮ ਕੱਢਣ ਦਾ ਤਰੀਕਾ ਅਤੇ ਸਿਧਾਂਤ

ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਅਤੇ ਲੋੜਾਂ

1. ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਪ੍ਰਾਇਮਰੀ ਢਾਂਚੇ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ

2. ਹੋਰ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰੋ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਕੱਢਣ ਵੇਲੇ ਆਰਐਨਏ ਦਖਲ ਨੂੰ ਛੱਡ ਕੇ)

3. ਕੋਈ ਵੀ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਅਤੇ ਧਾਤੂ ਆਇਨਾਂ ਦੀ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨਹੀਂ ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਜੋ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਐਨਜ਼ਾਈਮਾਂ ਨੂੰ ਰੋਕਦੇ ਹਨ

4. ਮੈਕਰੋਮੋਲੀਕੂਲਰ ਪਦਾਰਥ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਅਤੇ ਲਿਪਿਡਸ ਨੂੰ ਜਿੰਨਾ ਸੰਭਵ ਹੋ ਸਕੇ ਘਟਾਓ।

ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਕੱਢਣ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਿਧੀ

1. ਫਿਨੋਲ/ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਕੱਢਣ ਦਾ ਤਰੀਕਾ

ਇਸਦੀ ਖੋਜ 1956 ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਫਿਨੋਲ/ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਨਾਲ ਸੈੱਲ ਟੁੱਟੇ ਹੋਏ ਤਰਲ ਜਾਂ ਟਿਸ਼ੂ ਹੋਮੋਜਨੇਟ ਦਾ ਇਲਾਜ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੇ ਹਿੱਸੇ, ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਡੀਐਨਏ, ਜਲਮਈ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ ਘੁਲ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਲਿਪਿਡ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੈਵਿਕ ਪੜਾਅ ਵਿੱਚ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੋਵਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਸਥਿਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਪੜਾਅ

2. ਅਲਕੋਹਲ ਵਰਖਾ

ਈਥਾਨੌਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਹਾਈਡਰੇਸ਼ਨ ਪਰਤ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚਾਰਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹ ਦਾ ਪਰਦਾਫਾਸ਼ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚਾਰਜ ਕੀਤੇ ਗਏ ਆਇਨ ਜਿਵੇਂ ਕਿ NA﹢ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਲ ਕੇ ਇੱਕ ਪ੍ਰਸਾਰ ਬਣਾ ਸਕਦੇ ਹਨ।

3. ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫਿਕ ਕਾਲਮ ਵਿਧੀ

ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਿਲਿਕਾ-ਅਧਾਰਿਤ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਸਮੱਗਰੀ ਦੁਆਰਾ, ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਆਰਐਨਏ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਲੰਘ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹਣ ਲਈ ਉੱਚ ਨਮਕ ਅਤੇ ਘੱਟ pH ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਲਈ ਘੱਟ ਲੂਣ ਅਤੇ ਉੱਚ pH ਨਾਲ ਇਲੂਟ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਐਸਿਡ.

4. ਥਰਮਲ ਕਰੈਕਿੰਗ ਅਲਕਲੀ ਵਿਧੀ

ਅਲਕਲੀਨ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਉਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਸਹਿ-ਸਹਿਯੋਗੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬੰਦ ਸਰਕੂਲਰ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡਾਂ ਅਤੇ ਲੀਨੀਅਰ ਕ੍ਰੋਮੈਟਿਨ ਵਿਚਕਾਰ ਟੌਪੋਲੋਜੀਕਲ ਅੰਤਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਖਾਰੀ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ, ਵਿਕਾਰਿਤ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।

5. ਉਬਾਲਣ ਪਾਈਰੋਲਿਸਿਸ ਵਿਧੀ

ਡੀਐਨਏ ਘੋਲ ਨੂੰ ਲੀਨੀਅਰ ਡੀਐਨਏ ਅਣੂਆਂ ਦੀਆਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦਾ ਲਾਭ ਲੈਣ ਲਈ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਡੀਨੈਚੁਰਡ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਸੈਲੂਲਰ ਮਲਬੇ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਪ੍ਰਕਿਰਤੀ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਗਰਮੀ ਨਾਲ ਇਲਾਜ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।

6. ਨੈਨੋਮੈਗਨੈਟਿਕ ਮਣਕੇ ਵਿਧੀ

ਸੁਪਰਪੈਰਾਮੈਗਨੈਟਿਕ ਨੈਨੋਪਾਰਟਿਕਲ ਦੀ ਸਤਹ ਨੂੰ ਸੁਧਾਰਨ ਅਤੇ ਸੋਧਣ ਲਈ ਨੈਨੋ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਸੁਪਰਪੈਰਾਮੈਗਨੈਟਿਕ ਸਿਲੀਕਾਨ ਆਕਸਾਈਡ ਨੈਨੋ-ਚੁੰਬਕੀ ਮਣਕੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਚੁੰਬਕੀ ਮਣਕੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੂਖਮ ਇੰਟਰਫੇਸ 'ਤੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਪਛਾਣ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹ ਸਕਦੇ ਹਨ।ਸਿਲਿਕਾ ਨੈਨੋਸਫੀਅਰਜ਼ ਦੀਆਂ ਸੁਪਰਪੈਰਾਮੈਗਨੈਟਿਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਚੈਓਟ੍ਰੋਪਿਕ ਲੂਣ (ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਲੋਰਾਈਡ, ਗੁਆਨੀਡੀਨ ਆਈਸੋਥੀਓਸਾਈਨੇਟ, ਆਦਿ) ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਅਤੇ ਇੱਕ ਬਾਹਰੀ ਚੁੰਬਕੀ ਖੇਤਰ, ਡੀਐਨਏ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਖੂਨ, ਜਾਨਵਰਾਂ ਦੇ ਟਿਸ਼ੂ, ਭੋਜਨ, ਜਰਾਸੀਮ ਸੂਖਮ ਜੀਵਾਣੂਆਂ ਅਤੇ ਹੋਰ ਨਮੂਨੇ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।


ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਮਾਰਚ-18-2022