Teknik Veriler
Kolon/tuz giderme plakası sephadex g-25 kullanım talimatları
Ürün Tanıtımı
Dextran G-25 tuzdan arındırma kolonu/plakası, esas olarak ağ yapılı dekstran jel polimer bileşiklerinde moleküler elek fonksiyonunu kullanır. Ayrılan maddelerin farklı moleküler ağırlık büyüklükleri nedeniyle, ayrılan maddeler G-25 jelinden geçtiğinde, büyük moleküler ağırlığa sahip maddeler (proteinler gibi) jel parçacıklarının dışında bloke edilir ve jel parçacıkları arasındaki boşluktan dışarı akar, işlem kısadır ve hareket hızı yüksektir, bu nedenle büyük moleküler ağırlığa sahip maddeler önce kolondan/plakadan akacaktır. Küçük moleküler ağırlığa sahip maddeler (örneğin tuzlar) jel parçacıklarının mikro gözeneklerine nüfuz edebilir, işlem uzun ve yavaştır ve daha yüksek moleküler ağırlığa sahip maddelerin jel kolondan/plakadan dışarı akması daha uzun sürer, bu nedenle sonunda yıkanırlar ve böylece maddeler ayrılır.
Sephadex G-25 serisi medyanın parametreleri tabloda gösterilmiştir
| Proje | parametrik |
| Özellikler | Kirli Beyaz Jel |
| Ortalama parçacık boyutu (kuru) | 150±100μm 92,8 |
| Parçacık boyutu dağılımı (45-165μm)% | ≥80 |
| Bölünmüş Aralık (Portekizce) | 100-5000 |
| Ayırma Aralığı (Globulin) | 1000-5000 |
| Su oranı (ml ıslak tutkal/g kuru toz) | 2.3-2.7 |
| Doğrusal Akış Hızı (0.3MPA, cm/h) | 697.1 |
| Maksimum Akış Hızı (cm/h) | 150 |
| Koruma çözümü | 0.2M NaAc %20 etanol |
| depolama koşulları | 4'C-30'C |
Model numarası G, jelin gramı başına emilen su miktarını ifade eder, örneğin G-25 jel ortamı, kuru jelin gramı başına 2,5 ml su emildiğini, yani jel genleşme katsayısını, yani jel parçacıklarının gözenek boyutunu ifade eder.
Sephadex G-25 serisi kromatografi ortamları tampon değişimi, protein tuzdan arındırma, farklı molekül ağırlıklarındaki proteinlerin ayrılması vb. için yaygın olarak kullanılır. Tuzdan arındırma ve tamponlama için maksimum numune hacmi kolon yatağı hacminin %30'una kadar olabilir.
İş akışı
1. Hoparlör/Tablet Dengeleme: Önceden yüklenmiş G-25 Sefadex'li hoparlör/tablet dik konuma getirildiğinde, G-25 tuz giderme kolonu/tabletini kolon katmanının hacminin 5 ila 10 katı bir tamponla dengeleyin. (Not: Tampon, değiştirilmesi istenen tampondur, örn. PBS, deiyonize su, vb.; dikkatli olun, akış hızını kontrol edin)
2. Örnekleme: Jel kolonu/plakası tamponla dengelendikten sonra, örneği pipetleyin ve yavaşça jel yüzeyindeki eleğe ekleyin, alt kapağı açın ve örneğin jel ile aynı hizaya gelene kadar yavaşça jele girmesine izin verin. (Not: Alttaki örnek hacmi genellikle kolon katmanı hacminin %10-30'udur, örnek viskozitesi çok yüksek olmamalıdır, aksi takdirde G25 bezinin kullanım ömrü kısalır).
3. Elüsyon: Numune, jele tamamen girdikten sonra elüsyon tamponuyla elüe edilir. (Not: Önerilen numune akış hızı yaklaşık 1-2 ml/dakikadır. Elüsyon hacmi genellikle numune hacminin 1,2-2,0 katıdır).
4. Saflaştırma ve rejenerasyon: Bazı proteinler tuzlu çözeltide denatüre olur, bu nedenle kolon yatağını 0,2 M NaOH veya başka bir iyonik olmayan deterjanla yıkayarak bu proteinlerin saflaştırılması gerekebilir.
5. Saklama: Deneyden sonra %0,02’lik sodyum azit solüsyonunda veya %20’lik etanol solüsyonunda saklayın.