Hrubá separace a jemná separace čištění bílkovin

Separace a čištění proteinů je široce používáno v biochemickém výzkumu a aplikacích a je důležitou provozní dovedností.SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument sestavil obsah hrubé separace a jemné separaceproteinočista pro každého.Typická eukaryotická buňka může obsahovat tisíce různých proteinů, některé jsou velmi bohaté a některé obsahují jen několik kopií.Pro studium určitého proteinu je nutné protein nejprve očistit od jiných proteinů a nebílkovinných molekul.

19

Hrubá separace

Když se získá proteinový extrakt (někdy smíchaný s nukleovými kyselinami, polysacharidy atd.), vybere se soubor vhodných metod k oddělení požadovanýchproteinod jiných nečistot.Obecně tento krok separace používá metody, jako je vysolování, akumulace izoelektrického bodu a frakcionace organickým rozpouštědlem.Tyto metody se vyznačují jednoduchostí a velkou zpracovatelskou kapacitou, která dokáže odstranit mnoho nečistot a koncentrovat proteinový roztok.Některé proteinové extrakty mají velký objem a nejsou vhodné pro zahušťování akumulací nebo vysolováním.Pro zahuštění si můžete vybrat ultrafiltraci, gelovou filtraci, mrazicí vakuové sušení nebo jiné metody.

Jemné oddělení

Po hrubé frakcionaci vzorku je objem obecně malý a většina nečistot byla odstraněna.Pro další čištění chromatografické metody obecně zahrnují gelovou filtraci, iontoměničovou chromatografii, adsorpční chromatografii a afinitní chromatografii.V případě potřeby můžete jako konečný proces čištění zvolit také elektroforézu včetně zónové elektroforézy, nastavení izoelektrických bodů atd.Metoda použitá pro oddělení úrovně pododdělení je obecně malá při plánování, ale s vysokým rozlišením.

Krystalizace je konečný proces separace a čištění proteinů.Přestože proces krystalizace nezaručuje, že protein musí být jednotný, je to pouze tehdy, když určitý protein má v roztoku výhodu, že tvoří krystal.Samotný proces krystalizace je doprovázen určitým stupněm čištění a rekrystalizace může odstranit malé množství falšovaného proteinu.Od denaturaceproteinnebyl nikdy nalezen během procesu krystalizace, krystalizace proteinu je nejen známkou čistoty, ale také mocným vodítkem k určení, že produkt je ve svém přirozeném stavu.


Čas odeslání: 19. listopadu 2020