הפרדה גסה והפרדה עדינה של טיהור חלבון

ההפרדה והטיהור של חלבונים נמצאים בשימוש נרחב במחקר וביישום ביוכימיה ומהווה מיומנות תפעולית חשובה.חברת SCG Protein Purification System-Saipu Instrument ריכזה את תכולת ההפרדה הגולמית וההפרדה העדינה שלחֶלְבּוֹןטיהור לכולם.תא איקריוטי טיפוסי יכול להכיל אלפי חלבונים שונים, חלקם עשירים מאוד וחלקם מכילים רק כמה עותקים.על מנת לחקור חלבון מסוים, יש צורך תחילה לטהר את החלבון מחלבונים אחרים וממולקולות שאינן חלבוניות.

19

הפרדה גסה

כאשר מתקבלת תמצית החלבון (לעיתים מעורבת עם חומצות גרעין, פוליסכרידים וכו'), נבחרת קבוצה של שיטות מתאימות להפרדת הרצויחֶלְבּוֹןמפני זיהומים אחרים.בדרך כלל, שלב זה של הפרדה משתמש בשיטות כמו המלחה, הצטברות נקודות איזואלקטריות וחלוקה של ממס אורגני.שיטות אלו מאופיינות בפשטות וביכולת עיבוד גדולה, שיכולה להסיר זיהומים רבים ולרכז את תמיסת החלבון.חלק מתמציות החלבון גדולות בנפחן ואינן מתאימות לריכוז על ידי הצטברות או המלחה.ניתן לבחור באולטרה סינון, סינון ג'ל, ייבוש ואקום בהקפאה או שיטות אחרות לריכוז.

הפרדה יפה

לאחר חלוקה גסה של הדגימה, הנפח בדרך כלל קטן, ורוב הזיהומים הוסרו.לטיהור נוסף, שיטות כרומטוגרפיה כוללות בדרך כלל סינון ג'ל, כרומטוגרפיה של חילופי יונים, כרומטוגרפיה ספיחה וכרומטוגרפיה זיקה.במידת הצורך, ניתן גם לבחור באלקטרופורזה, כולל אלקטרופורזה אזורית, סט נקודות איזואלקטריות וכו' כתהליך הטיהור הסופי.השיטה המשמשת להפרדה ברמת החלוקה היא בדרך כלל קטנה בתכנון, אך ברזולוציה גבוהה.

התגבשות היא התהליך הסופי של הפרדת חלבון וטיהור.אמנם תהליך ההתגבשות אינו מבטיח שהחלבון חייב להיות אחיד, אך רק כאשר לחלבון מסוים יש יתרון בתמיסה ליצירת גביש.תהליך ההתגבשות עצמו מלווה במידה מסוימת של טיהור, והתגבשות מחדש יכולה להסיר כמות קטנה של חלבון מזויף.מאז דנטורציהחֶלְבּוֹןמעולם לא נמצאה במהלך תהליך ההתגבשות, התגבשות החלבון היא לא רק סימן לטוהר, אלא גם קו מנחה רב עוצמה לקבוע שהמוצר נמצא במצבו הטבעי.


זמן פרסום: 19 בנובמבר 2020