タンパク質精製の粗分離と微分離

タンパク質の分離と精製は生化学の研究と応用で広く使用されており、重要な操作スキルです。SCG タンパク質精製システム会社-Saipu Instrument は、タンパク質の粗分離と微分離の内容をまとめました。タンパク質全ての人に浄化を。典型的な真核細胞には何千もの異なるタンパク質が含まれており、非常に豊富なタンパク質もあれば、数コピーしか含まないタンパク質もあります。特定のタンパク質を研究するには、まずそのタンパク質を他のタンパク質や非タンパク質分子から精製する必要があります。

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粗分離

タンパク質抽出物 (核酸、多糖類などと混合される場合もあります) が得られると、目的のタンパク質を分離するための一連の適切な方法が選択されます。タンパク質他の不純物から。一般に、この分離ステップでは、塩析、等電点蓄積、有機溶媒分別などの方法が使用されます。これらの方法は、多くの不純物を除去し、タンパク質溶液を濃縮することができる、簡単さと大きな処理能力を特徴としています。一部のタンパク質抽出物は体積が大きく、蓄積や塩析による濃縮には適していません。限外濾過、ゲル濾過、凍結真空乾燥などの濃縮方法を選択できます。

微細な分離

サンプルを大まかに分別すると、その体積は通常小さくなり、ほとんどの不純物が除去されます。さらに精製するためのクロマトグラフィー方法には、一般にゲル濾過、イオン交換クロマトグラフィー、吸着クロマトグラフィー、およびアフィニティークロマトグラフィーが含まれます。必要に応じて、最終精製プロセスとしてゾーン電気泳動、等電点セットなどの電気泳動を選択することもできます。区画レベルの分離に使用される方法は、一般に計画の規模は小さいですが、解像度は高くなります。

結晶化はタンパク質の分離と精製の最終プロセスです。結晶化プロセスではタンパク質が均一である必要はありませんが、溶液中で結晶を形成するのに特定のタンパク質が有利な場合にのみ行われます。結晶化プロセス自体はある程度の精製を伴い、再結晶化により少量の混入タンパク質を除去できます。変性してからタンパク質結晶化プロセス中には一度も検出されたことがないため、タンパク質の結晶化は純度の兆候であるだけでなく、製品が自然な状態にあることを判断するための強力なガイドラインでもあります。


投稿日時: 2020 年 11 月 19 日