Separarea și purificarea proteinelor este utilizată pe scară largă în cercetarea și aplicarea biochimiei și este o abilitate operațională importantă.SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument a compilat separarea brută și conținutul de separare fină aproteinăpurificare pentru toată lumea.O celulă eucariotă tipică poate conține mii de proteine ​​diferite, unele sunt foarte bogate, iar altele conțin doar câteva copii.Pentru a studia o anumită proteină, este necesar să se purifice mai întâi proteina de alte proteine ​​și molecule non-proteice.

Separare grosieră

Când se obține extractul proteic (uneori amestecat cu acizi nucleici, polizaharide etc.), se selectează un set de metode adecvate pentru a separa cele dorite.proteinădin alte impurități.În general, această etapă de separare utilizează metode cum ar fi sărarea, acumularea punctului izoelectric și fracționarea cu solvent organic.Aceste metode se caracterizează prin simplitate și capacitate mare de procesare, care pot elimina multe impurități și pot concentra soluția de proteine.Unele extracte proteice au un volum mare și nu sunt potrivite pentru concentrare prin acumulare sau sărare.Puteți alege ultrafiltrare, filtrare pe gel, uscare prin congelare în vid sau alte metode de concentrare.

Separare fină

După fracţionarea grosieră a probei, volumul este în general mic, iar majoritatea impurităţilor au fost îndepărtate.Pentru purificare suplimentară, metodele de cromatografie includ în general filtrarea pe gel, cromatografia cu schimb de ioni, cromatografia de adsorbție și cromatografia de afinitate.Dacă este necesar, puteți alege, de asemenea, electroforeza, inclusiv electroforeza de zonă, set de puncte izoelectrice etc. ca proces final de purificare.Metoda utilizată pentru separarea nivelului de subdiviziune este în general mică în planificare, dar cu rezoluție mare.

Cristalizarea este procesul final de separare și purificare a proteinelor.Deși procesul de cristalizare nu asigură că proteina trebuie să fie uniformă, este doar atunci când o anumită proteină are un avantaj în soluție pentru a forma un cristal.Procesul de cristalizare în sine este însoțit de un anumit grad de purificare, iar recristalizarea poate elimina o cantitate mică de proteină alterată.Din moment ce denaturatproteinănu a fost găsit niciodată în timpul procesului de cristalizare, cristalizarea proteinelor nu este doar un semn de puritate, ci și un ghid puternic pentru a determina dacă produsul este în starea sa naturală.