A fehérjék szétválasztását és tisztítását széles körben használják a biokémiai kutatásokban és alkalmazásokban, és fontos műveleti készség.Az SCG Protein Purification System Company-Saipu Instrument összeállította a nyers elválasztás és a finom elválasztás tartalmát.fehérjemegtisztulás mindenki számára.Egy tipikus eukarióta sejt több ezer különböző fehérjét tartalmazhat, némelyik nagyon gazdag, mások pedig csak néhány másolatot tartalmaznak.Egy bizonyos fehérje tanulmányozásához először meg kell tisztítani a fehérjét más fehérjéktől és nem fehérje molekuláktól.

Durva szétválasztás

Amikor megkapjuk a fehérjekivonatot (néha nukleinsavakkal, poliszacharidokkal stb. keverve), megfelelő módszereket választunk ki a kívánt kivonatok elkülönítésére.fehérjeegyéb szennyeződésektől.Általában ez az elválasztási lépés olyan módszereket használ, mint a kisózás, az izoelektromos pontfelhalmozás és a szerves oldószeres frakcionálás.Ezeket a módszereket az egyszerűség és a nagy feldolgozási kapacitás jellemzi, amelyek sok szennyeződést eltávolítanak és a fehérjeoldatot koncentrálják.Egyes fehérjekivonatok nagy térfogatúak, és nem alkalmasak akkumulációval vagy kisózással történő koncentrálásra.Választhat ultraszűrést, gélszűrést, fagyasztva vákuumszárítást vagy egyéb töményítési módszereket.

Finom elválasztás

A minta durva frakcionálása után a minta térfogata általában kicsi, és a szennyeződések nagy részét eltávolították.A további tisztításhoz a kromatográfiás módszerek általában gélszűrést, ioncserélő kromatográfiát, adszorpciós kromatográfiát és affinitáskromatográfiát foglalnak magukban.Szükség esetén választhatja az elektroforézist is, beleértve a zónaelektroforézist, az izoelektromos pontkészletet stb., mint végső tisztítási eljárást.A felosztási szintű szétválasztáshoz használt módszer általában kicsi tervezésű, de nagy felbontású.

A kristályosítás a fehérje elválasztásának és tisztításának végső folyamata.Bár a kristályosítási folyamat nem biztosítja, hogy a fehérjének egységesnek kell lennie, ez csak akkor történik meg, ha egy bizonyos fehérje előnyt jelent az oldatban, hogy kristályt képezzen.Magát a kristályosítási folyamatot bizonyos fokú tisztítás kíséri, és az átkristályosítással kis mennyiségű hamisított fehérje eltávolítható.Denaturálás ótafehérjeA kristályosodási folyamat során soha nem találták meg, a fehérje kristályosodása nem csak a tisztaság jele, hanem egyben erőteljes iránymutatás is a termék természetes állapotának meghatározásához.