Odvajanje i pročišćavanje proteina naširoko se koristi u biokemijskim istraživanjima i primjenama te je važna operativna vještina.Tvrtka SCG Protein Purification System-Saipu Instrument sastavila je sadržaj sirove separacije i fine separacijeproteinpročišćenje za sve.Tipična eukariotska stanica može sadržavati tisuće različitih proteina, neki su vrlo bogati, a neki sadrže samo nekoliko kopija.Da bi se proučavao određeni protein, potrebno je prvo pročistiti protein od drugih proteina i neproteinskih molekula.

Grubo odvajanje

Kada se dobije proteinski ekstrakt (ponekad pomiješan s nukleinskim kiselinama, polisaharidima itd.), odabire se niz odgovarajućih metoda za odvajanje željenogproteinod ostalih nečistoća.Općenito, ovaj korak odvajanja koristi metode kao što su isoljavanje, nakupljanje izoelektrične točke i frakcioniranje organskog otapala.Ove metode karakterizira jednostavnost i veliki kapacitet obrade, koji može ukloniti mnoge nečistoće i koncentrirati otopinu proteina.Neki proteinski ekstrakti su velikog volumena i nisu prikladni za koncentraciju nakupljanjem ili soljenjem.Možete odabrati ultrafiltraciju, gel filtraciju, vakuumsko sušenje smrzavanjem ili druge metode koncentriranja.

Fino odvajanje

Nakon grubog frakcioniranja uzorka, volumen je općenito mali, a većina nečistoća je uklonjena.Za daljnje pročišćavanje, metode kromatografije općenito uključuju gel filtraciju, kromatografiju ionske izmjene, adsorpcijsku kromatografiju i afinitetnu kromatografiju.Ako je potrebno, također možete odabrati elektroforezu, uključujući zonsku elektroforezu, postavljanje izoelektričnih točaka itd. kao završni postupak pročišćavanja.Metoda koja se koristi za odvajanje razine potpodjele općenito je mala u planiranju, ali s visokom rezolucijom.

Kristalizacija je konačni proces odvajanja i pročišćavanja proteina.Iako proces kristalizacije ne osigurava da protein mora biti ujednačen, samo kada određeni protein ima prednost u otopini može nastati kristal.Sam proces kristalizacije prati određeni stupanj pročišćavanja, a rekristalizacijom se može ukloniti mala količina krivotvorenog proteina.Budući da je denaturiranproteinnikada nije pronađen tijekom procesa kristalizacije, kristalizacija proteina nije samo znak čistoće, već i moćna smjernica za utvrđivanje je li proizvod u svom prirodnom stanju.