Methoden en zuivering van eiwitzuivering

Methodes vaneiwit zuivering:

Bij de methode van eiwitzuivering, scheiding en zuivering van eiwitten wordt het eiwit in opgeloste toestand vrijgemaakt uit de oorspronkelijke cellen of weefsels en blijft het in de oorspronkelijke natuurlijke staat zonder verlies van biologische activiteit.Om deze reden moet het materiaal dierlijk en vetweefsel verwijderen, moet het zaadmateriaal zelfs de verontreiniging van de zaadvacht door stoffen zoals tannines loslaten en moet het oliezaad bij voorkeur een laagkokend organisch oplosmiddel gebruiken.

1. De methode van eiwitzuivering, grootte en verschillende scheidingsanalysemethoden: dialyse en ultrafiltratie gebruiken deze eiwitten om door de aard van moleculen te gaan die niet door het semi-permeabele membraan kunnen gaan;dichtheidsgradiëntcentrifugatie De kwaliteit en dichtheid van het eiwit in het medium zullen een grotere impact hebben op deeltjes.De afwikkelingssnelheid is sneller;gelfiltratie is een soort kolomchromatografie.

2. Scheiding van oplosbaarheidsverschil in gebruik: elektroprecipitatie omdat de netto lading van eiwitmoleculen zich op het iso-elektrische punt nul bevindt, waardoor de elektrostatische afstoting tussen moleculen wordt verminderd, gemakkelijk te aggregeren en minimale oplosbaarheid;zoutoplossing gebruikt met zoutoplossing De concentratie verhoogt of verlaagt de oplosbaarheid van het eiwit.

3. De lading wordt gescheiden en geanalyseerd met verschillende methoden. De belangrijkste inhoud omvat elektroforese en ionenuitwisselingschromatografie.

4. Methoden vaneiwit zuiveringDe selectieve adsorptie en scheiding van eiwitten maakt gebruik van de kracht van deeltjesadsorptie.

5. Affiniteitschromatografie is gebaseerd op de scheiding van liganden.Deze biologische eigenschap maakt het mogelijk dat eiwitmoleculen specifiek in plaats van covalent binden aan een ander molecuul dat een ligand wordt genoemd.

6. Methode voor eiwitzuivering: Neerslagmethode met organische oplosmiddelen bij lage temperatuur: Gebruik organische oplosmiddelen die mengbaar zijn met water, zoals methanol en ethanol, om de oplosbaarheid en neerslag van de meeste eiwitten te verminderen.Deze methode is hoger dan de resolutie bij uitzouten, maar het eiwit denatureert meer. Als dit gemakkelijk is, moet dit bij lage temperatuur worden gedaan.

6ca4b93f5

Hoe te zuivereneiwit zuivering:

Hoe eiwitten te zuiveren, eiwitten zijn een groot molecuul en albumine met verschillende moleculaire afmetingen. Er zijn enkele eenvoudigere methoden om eiwitten en materialen van kleine moleculen te scheiden, en ook een gescheiden eiwitmengsel.De belangrijkste methoden voor het scheiden van eiwitten van verschillende moleculaire groottes zijn dialyse, ultrafiltratie, gelfiltratie en centrifugale scheiding.Dialyse en ultrafiltratie worden vaak gebruikt bij eiwitscheidingsmethoden.Het te scheiden dialysemengsel wordt in een dialysezak van een semipermeabel membraan geplaatst en vervolgens ter scheiding in de dialyseoplossing ondergedompeld.Ultrafiltratie is het proces waarbij water en andere kleine moleculen met behulp van middelpuntvliedende kracht of druk door een semi-permeabel membraan worden geleid en eiwitten in het semi-permeabele membraan worden opgevangen.Deze twee methoden kunnen worden gescheiden van op eiwitten gebaseerde macromoleculen en op anorganische zouten gebaseerde kleine moleculen.Ze worden vaak uitgezouten, gebruikt in combinatie met de zoutoplossingsmethode, of kunnen worden geïntroduceerd om deze twee methoden na het uitzouten te verwijderen met behulp van anorganische zoutoplossingen.

1. Hoe eiwit te zuiveren door de uitzoutingsmethode: De basis van de uitzoutingsmethode is dat de oplosbaarheid van eiwit in een verdunde zoutoplossing zal toenemen met de toename van de zoutconcentratie, maar wanneer de zoutconcentratie tot een bepaalde waarde stijgt, zal de De wateractiviteit zal toenemen.Afname, wat er op zijn beurt voor kan zorgen dat sommige eiwitten ladingen genereren door het oppervlak van de moleculaire structuur dat geleidelijk wordt geneutraliseerd, en het hydratatiemembraan geleidelijk wordt vernietigd, wat er uiteindelijk voor kan zorgen dat verwante eiwitten en moleculen agglomeratie ontwikkelen en neerslaan uit verschillende oplossingen.

2. Neerslagmethode met organische oplosmiddelen: Er zijn twee redenen om de oplosbaarheid van eiwitten in organische oplosmiddelen te verminderen: hoe eiwitten te zuiveren als een zoutoplossing met uitdroging;ten tweede kan de diëlektrische constante van organische oplosmiddelen dan water worden verlaagd in polaire oplosmiddelen.

3. Eiwitprecipitatiemiddel: eiwit als precipitatiemiddel werkt slechts op één type eiwitprecipitatie; veel voorkomende zijn alkalisch, eiwit, lectine en zware metalen.

4. Polyethyleenglycolprecipitatie: Hoe wateroplosbare niet-ionische polymeren te zuivereneiwit zuivering, zoals polyethyleenglycol en natriumdextransulfaat om eiwitten te precipiteren.


Posttijd: 27 oktober 2020