Phương pháp và tinh chế tinh chế protein

Phương pháp củatinh chế protein:

Phương pháp tinh chế protein, tách và tinh chế protein, protein được giải phóng khỏi tế bào hoặc mô ban đầu ở trạng thái hòa tan và giữ nguyên ở trạng thái tự nhiên ban đầu mà không mất hoạt tính sinh học.Vì lý do này, vật liệu phải loại bỏ mô động vật và mỡ, vật liệu hạt thậm chí phải loại bỏ lớp vỏ hạt bị nhiễm bẩn khỏi các chất như tannin, và hạt có dầu tốt nhất nên sử dụng dung môi hữu cơ có nhiệt độ sôi thấp.

1. Phương pháp tinh chế protein, kích thước và các phương pháp phân tích tách khác nhau: lọc máu và siêu lọc sử dụng các protein này để đi qua bản chất của các phân tử không thể đi qua màng bán thấm;ly tâm gradient mật độ Chất lượng và mật độ của protein trong môi trường sẽ có tác động lớn hơn đến các hạt.Tốc độ giải quyết nhanh hơn;lọc gel là một loại sắc ký cột.

2. Tách chênh lệch độ hòa tan trong sử dụng: kết tủa điện vì điện tích ròng của các phân tử protein ở điểm đẳng điện bằng 0, làm giảm lực đẩy tĩnh điện giữa các phân tử, dễ tổng hợp và độ hòa tan tối thiểu;dung dịch muối dùng với dung dịch muối Nồng độ làm tăng hoặc giảm độ hòa tan của protein.

3. Điện tích được tách và phân tích bằng các phương pháp khác nhau, nội dung chính bao gồm điện di và sắc ký trao đổi ion.

4. Phương pháptinh chế proteinSự hấp phụ và tách chọn lọc của protein tận dụng sức mạnh của sự hấp phụ hạt.

5. Sắc ký ái lực dựa trên việc tách các phối tử.Đặc tính sinh học này cho phép các phân tử protein liên kết đặc hiệu hơn là liên kết cộng hóa trị với một phân tử khác gọi là phối tử.

6. Phương pháp tinh chế protein: Phương pháp kết tủa dung môi hữu cơ ở nhiệt độ thấp: Sử dụng dung môi hữu cơ hòa tan với nước như metanol, etanol để giảm độ hòa tan và kết tủa của hầu hết các protein.Phương pháp này có độ phân giải cao hơn phương pháp muối hóa nhưng protein bị biến tính nhiều hơn. Khi dễ thực hiện thì nên thực hiện ở nhiệt độ thấp.

6ca4b93f5

Làm thế nào để thanh lọctinh chế protein:

Làm thế nào để tinh chế protein, protein là một phân tử lớn, và các kích thước phân tử khác nhau của albumin, có một số phương pháp đơn giản hơn để tách protein và các vật liệu phân tử nhỏ, cũng như tách hỗn hợp protein.Các phương pháp chính để tách protein có kích thước phân tử khác nhau là lọc máu, siêu lọc, lọc gel và tách ly tâm.Lọc máu và siêu lọc thường được sử dụng trong các phương pháp tách protein.Hỗn hợp lọc máu cần tách được đặt trong túi lọc máu làm bằng màng bán thấm, sau đó được ngâm trong dung dịch lọc máu để tách.Siêu lọc là quá trình cho nước và các phân tử nhỏ khác đi qua sử dụng lực ly tâm hoặc áp suất trong màng bán thấm và giữ lại các protein trong màng bán thấm.Hai phương pháp này có thể được tách ra khỏi các đại phân tử dựa trên protein và các phân tử nhỏ dựa trên muối vô cơ.Chúng thường được muối hóa, sử dụng kết hợp với phương pháp hòa tan muối hoặc có thể được giới thiệu để loại bỏ hai phương pháp này sau khi muối hóa bằng dung dịch muối vô cơ.

1. Cách tinh chế protein bằng phương pháp tách muối: Cơ sở của phương pháp tách muối là độ hòa tan của protein trong dung dịch muối loãng sẽ tăng khi tăng nồng độ muối, nhưng khi nồng độ muối tăng đến một giá trị nhất định thì độ hòa tan của protein trong dung dịch muối loãng sẽ tăng lên. hoạt độ nước sẽ tăng lên.Giảm, do đó có thể khiến một số protein tạo ra điện tích qua bề mặt cấu trúc phân tử bị trung hòa dần và màng hydrat hóa dần bị phá hủy, cuối cùng có thể khiến các protein và phân tử liên quan phát triển kết tụ và kết tủa từ các dung dịch khác nhau.

2. Phương pháp kết tủa bằng dung môi hữu cơ: Có hai lý do làm giảm khả năng hòa tan của protein trong dung môi hữu cơ: cách tinh chế protein dưới dạng dung dịch muối có khử nước;thứ hai, hằng số điện môi của dung môi hữu cơ so với nước có thể giảm trong dung môi phân cực.

3. Chất kết tủa protein: chất kết tủa protein chỉ tác dụng lên một hoặc một loại chất kết tủa protein, phổ biến là kiềm, protein, lectin và kim loại nặng.

4. Kết tủa polyetylen glycol: Cách tinh chế các polyme không ion hòa tan trong nước chotinh chế protein, chẳng hạn như polyethylen glycol và natri dextran sunfat để kết tủa protein.


Thời gian đăng: Oct-27-2020