Métodos e purificação de purificação de proteínas

Métodos depurificação de proteínas:

Método de purificação, separação e purificação de proteínas, a proteína é liberada das células ou tecidos originais em estado dissolvido e permanece no estado natural original sem perda de atividade biológica.Por esse motivo, o material deve remover tecido animal e adiposo, o material da semente deve ainda descascar a contaminação do tegumento por substâncias como os taninos, e a semente oleaginosa deve utilizar preferencialmente um solvente orgânico de baixo ponto de ebulição.

1. O método de purificação de proteínas, tamanho e diferentes métodos de análise de separação: diálise e ultrafiltração utilizam essas proteínas para passar pela natureza de moléculas que não conseguem passar pela membrana semipermeável;centrifugação em gradiente de densidade A qualidade e a densidade da proteína no meio terão um impacto maior nas partículas.A velocidade de acomodação é mais rápida;a filtração em gel é um tipo de cromatografia em coluna.

2. Separação da diferença de solubilidade em uso: eletroprecipitação porque a carga líquida das moléculas de proteína está no ponto isoelétrico zero, reduzindo a repulsão eletrostática entre as moléculas, fácil de agregar e solubilidade mínima;solução salina usada com solução salina A concentração aumenta ou diminui a solubilidade da proteína.

3. A carga é separada e analisada por diferentes métodos, os conteúdos principais incluem eletroforese e cromatografia de troca iônica.

4. Métodos depurificação de proteínasA adsorção seletiva e separação de proteínas utilizam a força da adsorção de partículas.

5. A cromatografia de afinidade baseia-se na separação de ligantes.Esta característica biológica permite que as moléculas de proteína se liguem especificamente, em vez de covalentemente, a outra molécula chamada ligante.

6. Método de purificação de proteínas: Método de precipitação com solvente orgânico de baixa temperatura: Use solventes orgânicos miscíveis com água, como metanol, etanol, para reduzir a solubilidade e a precipitação da maioria das proteínas.Este método é maior que a resolução de salga, mas a proteína desnatura mais. Quando fácil, deve ser feito em temperatura baixa.

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Como purificarpurificação de proteínas:

Como purificar proteínas, a proteína é uma molécula grande e vários tamanhos moleculares de albumina, existem alguns métodos mais simples para separar proteínas e materiais de moléculas pequenas, e também separar misturas de proteínas.Os principais métodos para separar proteínas de diferentes tamanhos moleculares são diálise, ultrafiltração, filtração em gel e separação centrífuga.Diálise e ultrafiltração são comumente usadas em métodos de separação de proteínas.A mistura de diálise a ser separada é colocada em uma bolsa de diálise feita de membrana semipermeável e depois imersa na solução de diálise para separação.Ultrafiltração é o processo de passagem de água e outras moléculas pequenas usando força centrífuga ou pressão em uma membrana semipermeável e aprisionando proteínas na membrana semipermeável.Esses dois métodos podem ser separados de macromoléculas baseadas em proteínas e pequenas moléculas inorgânicas baseadas em sal.Eles são frequentemente salgados, usados ​​em conjunto com o método de dissolução de sal, ou podem ser introduzidos para eliminar esses dois métodos após a salga usando soluções de sal inorgânico.

1. Como purificar proteínas pelo método de salga: A base do método de salga é que a solubilidade da proteína em solução salina diluída aumentará com o aumento da concentração de sal, mas quando a concentração de sal aumenta para um certo valor, o a atividade da água será aumentada.Diminuição, que por sua vez pode fazer com que algumas proteínas gerem cargas através da superfície da estrutura molecular para serem gradualmente neutralizadas, e a membrana de hidratação é gradualmente destruída, o que pode eventualmente fazer com que proteínas e moléculas relacionadas desenvolvam aglomeração e precipitem a partir de diferentes soluções.

2. Método de precipitação com solventes orgânicos: Existem duas razões para reduzir a solubilidade da proteína em solventes orgânicos: como purificar a proteína como uma solução salina com desidratação;em segundo lugar, a constante dielétrica dos solventes orgânicos do que a água pode ser reduzida em solventes polares.

3. Agente precipitante de proteínas: a proteína como agente precipitante atua apenas em um tipo ou um de precipitação de proteínas, os mais comuns são alcalinos, proteínas, lectinas e metais pesados.

4. Precipitação de polietilenoglicol: Como purificar polímeros não iônicos solúveis em água parapurificação de proteínas, como polietilenoglicol e sulfato de dextrano de sódio para precipitar proteínas.


Horário da postagem: 27 de outubro de 2020