Методларыбелок чистарту:

Протеинны чистарту, протеинны аеру һәм чистарту ысулы, протеин эре күзәнәкләрдән яки тукымалардан эретелгән хәлдә чыгарыла һәм биологик активлыкны югалтмыйча, табигый хәлдә кала.Шуңа күрә, материал хайваннарны һәм адипоз тукымаларын чыгарырга тиеш, орлык материалы хәтта танин кебек матдәләрдән орлык пальтосының пычрануын кабызырга тиеш, һәм май орлыгы яхшырак кайнап торган органик эреткеч кулланырга тиеш.

1. Протеинны чистарту ысулы, зурлыгы һәм төрле аеру анализлау ысуллары: диализ һәм ультрафильтрлау бу протеиннарны ярым үткәргеч мембрана аша уза алмаган молекулалар табигате аша үткәрәләр;тыгызлык градиент центрифугация Аксымның сыйфаты һәм тыгызлыгы кисәкчәләргә зуррак тәэсир итәчәк.Тизлекне урнаштыру тизрәк;гель фильтрлау - багана хроматографиясенең бер төре.

2. Куллануда эрүчәнлек аермасын аеру: электро-явым-төшем, чөнки протеин молекулаларының чиста корылмасы нуль изоэлектрик ноктасында, молекулалар арасында электростатик репулицияне киметә, агрегатлау җиңел, һәм минималь эретүчәнлек;тоз эремәсе белән кулланылган тоз эремәсе концентрация аксымның эрүчәнлеген арттыра яки киметә.

3. Корылма төрле ысуллар белән аерыла һәм анализлана, төп эчтәлеккә электрофорез һәм ион алмашу хроматографиясе керә.

4. Методларбелок чистартуБелгечләрне сайлап алу һәм аеру кисәкчәләрнең adsorption көчен куллана.

5. Якынлык хроматографиясе лигандларның аерылуына нигезләнә.Бу биологик характеристика белок молекулаларын лиганд дип аталган бүтән молекулага ковалентлы рәвештә бәйләргә мөмкинлек бирә.

6. Протеинны чистарту ысулы: Түбән температуралы органик эретүче явым-төшем ысулы: күпчелек протеиннарның эрүчәнлеген һәм явым-төшемен киметү өчен, метанол, этанол кебек су белән начар булган органик эреткечләрне кулланыгыз.Бу ысул тозлау резолюциясеннән югарырак, ләкин протеин күбрәк денатура. Easyиңел булганда, аны түбән температурада эшләргә кирәк.

Ничек чистартыргабелок чистарту:

Протеинны ничек чистартырга, протеин - зур молекула, һәм альбуминның төрле молекуляр зурлыклары, протеинны һәм кечкенә молекула материалларын аеру, шулай ук ​​протеин катнашмасын аеру өчен гадирәк ысуллар бар.Төрле молекуляр зурлыктагы протеиннарны аеруның төп ысуллары - диализ, ультрафильтрлау, гель фильтрлау һәм центрифугааль аеру.Диализ һәм ультрафильтрлау гадәттә протеинны аеру ысулларында кулланыла.Аерылырга тиешле диализ катнашмасы ярым үткәргеч мембранадан ясалган диализ сумкасына урнаштырыла, аннары аеру өчен диализ эремәсенә чумдырыла.Ультрафильтрлау - центрифугаль көч яки ярым үткәргеч мембранада басым кулланып, ярым үткәргеч мембранада аксымнарны тотып су һәм башка кечкенә молекулаларны узу процессы.Бу ике ысулны протеинга нигезләнгән макромолекулалардан һәм органик булмаган тоз нигезендәге кечкенә молекулалардан аерырга мөмкин.Алар еш тозланган, тозны эретү ысулы белән берлектә кулланыла, яки органик булмаган тоз эремәләрен кулланып тоз салганнан соң бу ике ысулны куллану өчен кертелергә мөмкин.

1. Протеинны тозлау ысулы белән ничек чистартырга: Тозлау ысулының нигезе шунда: тозның эремчек тозында эрүчәнлеге тоз концентрациясе арту белән артачак, ләкин тоз концентрациясе билгеле бер кыйммәткә артканда, су активлыгы артачак.Азайу, үз чиратында, кайбер протеиннарның молекуляр структур өслеге аша заряд барлыкка китерүенә китерә ала, һәм гидратлашу мембранасы әкренләп юкка чыга, ахыр чиктә бәйләнешле протеиннар һәм молекулалар агломерация үсешенә һәм төрле эремәләрдән явым-төшемгә китерергә мөмкин.

2. Органик эретүче явым-төшем ысулы: Органик эреткечләрдә протеинның эрүчәнлеген киметүнең ике сәбәбе бар: аксымны тоз эремәсе итеп сусызландыру белән ничек чистартырга;икенчедән, поляр эреткечләрдә суга караганда органик эреткечләрнең диэлектрик тотрыклылыгы кимергә мөмкин.

3. Протеин явым-төшем агенты: протеин явым-төшем агенты буларак бер төрдә яки протеин явым-төшемендә генә эшли, гадәтиләре - эшкәртү, протеин, лектин һәм авыр металл.

4. Полиэтилен гликол явым-төшеме: суда эри торган ион булмаган полимерларны ничек чистартыргабелок чистарту, протеиннарны чокырлау өчен полиэтилен гликол һәм натрий декстран сульфаты кебек.