Metódyčistenie bielkovín:

Metóda čistenia proteínu, separácie a čistenia proteínu, proteín sa z pôvodných buniek alebo tkanív uvoľňuje v rozpustenom stave a zostáva v pôvodnom prirodzenom stave bez straty biologickej aktivity.Z tohto dôvodu by mal materiál odstraňovať živočíšne a tukové tkanivo, materiál semien by mal dokonca odlupovať kontamináciu obalu semena od látok, ako sú triesloviny, a olejnaté semeno by malo prednostne používať organické rozpúšťadlo s nízkou teplotou varu.

1. Metóda čistenia proteínov, veľkosť a rôzne metódy separačnej analýzy: dialýza a ultrafiltrácia využívajú tieto proteíny na prechod cez povahu molekúl, ktoré nemôžu prejsť cez polopriepustnú membránu;centrifugácia s hustotným gradientom Kvalita a hustota proteínu v médiu bude mať väčší vplyv na častice.Rýchlosť usadzovania je vyššia;gélová filtrácia je druh stĺpcovej chromatografie.

2. Separácia rozdielu rozpustnosti pri použití: elektroprecipitácia, pretože čistý náboj proteínových molekúl je v nulovom izoelektrickom bode, čím sa znižuje elektrostatické odpudzovanie medzi molekulami, ľahko sa agreguje a má minimálna rozpustnosť;soľný roztok použitý so soľným roztokom Koncentrácia zvyšuje alebo znižuje rozpustnosť proteínu.

3. Náboj sa separuje a analyzuje rôznymi metódami, hlavným obsahom je elektroforéza a iónomeničová chromatografia.

4. Spôsobyčistenie bielkovínSelektívna adsorpcia a separácia proteínov využíva silu adsorpcie častíc.

5. Afinitná chromatografia je založená na separácii ligandov.Táto biologická charakteristika umožňuje molekulám proteínu viazať sa špecificky a nie kovalentne na inú molekulu nazývanú ligand.

6. Spôsob čistenia proteínov: Metóda zrážania organickým rozpúšťadlom pri nízkej teplote: Na zníženie rozpustnosti a zrážania väčšiny proteínov používajte organické rozpúšťadlá, ktoré sú miešateľné s vodou, ako je metanol, etanol.Táto metóda je vyššia ako rozlíšenie vysoľovania, ale proteín viac denaturuje. Keď je to jednoduché, malo by sa to robiť pri nízkej teplote.

Ako sa očistiťčistenie bielkovín:

Ako čistiť proteín, proteín je veľká molekula a albumín s rôznymi veľkosťami molekúl, existuje niekoľko jednoduchších metód na oddelenie materiálov proteínov a malých molekúl a tiež oddelená zmes proteínov.Hlavnými metódami separácie proteínov rôznych molekúl sú dialýza, ultrafiltrácia, gélová filtrácia a odstredivá separácia.Dialýza a ultrafiltrácia sa bežne používajú v metódach separácie proteínov.Dialyzačná zmes, ktorá sa má separovať, sa umiestni do dialyzačného vaku vyrobeného zo semipermeabilnej membrány a potom sa ponorí do dialyzačného roztoku na separáciu.Ultrafiltrácia je proces prechodu vody a iných malých molekúl pomocou odstredivej sily alebo tlaku v polopriepustnej membráne a zachytávaní proteínov v polopriepustnej membráne.Tieto dve metódy možno oddeliť od makromolekúl na báze proteínov a malých molekúl na báze anorganických solí.Často sa vysolujú, používajú sa v spojení s metódou rozpúšťania soli alebo sa môžu zaviesť na odstránenie týchto dvoch metód po vysolení s použitím roztokov anorganických solí.

1. Ako čistiť proteín metódou vysolovania: Základom metódy vysolovania je, že rozpustnosť proteínu v zriedenom soľnom roztoku sa bude zvyšovať so zvyšujúcou sa koncentráciou soli, ale keď sa koncentrácia soli zvýši na určitú hodnotu, aktivita vody sa zvýši.Pokles, ktorý môže následne spôsobiť, že niektoré proteíny generujú náboje cez povrch molekulárnej štruktúry, ktorý sa postupne neutralizuje a hydratačná membrána sa postupne ničí, čo môže nakoniec spôsobiť, že sa príbuzné proteíny a molekuly zhlukujú a vyzrážajú z rôznych roztokov.

2. Metóda zrážania organickým rozpúšťadlom: Existujú dva dôvody na zníženie rozpustnosti proteínu v organických rozpúšťadlách: ako čistiť proteín ako soľný roztok s dehydratáciou;po druhé, v polárnych rozpúšťadlách možno znížiť dielektrickú konštantu organických rozpúšťadiel ako vody.

3. Proteín zrážadlo: bielkovina ako zrážadlo pôsobí len na jeden alebo jeden typ zrážania bielkovín, bežné sú alkalické, bielkovinové, lektínové a ťažké kovy.

4. Zrážanie polyetylénglykolu: Ako čistiť vo vode rozpustné neiónové polyméry prečistenie bielkovínako je polyetylénglykol a dextránsulfát sodný na vyzrážanie proteínov.