ਦੇ ਢੰਗਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ:

ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਦਾ ਤਰੀਕਾ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਮੂਲ ਸੈੱਲਾਂ ਜਾਂ ਟਿਸ਼ੂਆਂ ਤੋਂ ਭੰਗ ਅਵਸਥਾ ਵਿੱਚ ਛੱਡਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਕਿਰਿਆਵਾਂ ਦੇ ਨੁਕਸਾਨ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਮੂਲ ਕੁਦਰਤੀ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ ਰਹਿੰਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਕਾਰਨ ਕਰਕੇ, ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਜਾਨਵਰਾਂ ਅਤੇ ਐਡੀਪੋਜ਼ ਟਿਸ਼ੂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਬੀਜ ਸਮੱਗਰੀ ਨੂੰ ਟੈਨਿਨ ਵਰਗੇ ਪਦਾਰਥਾਂ ਤੋਂ ਬੀਜ ਕੋਟ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਵੀ ਛਿੱਲ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਤੇਲ ਬੀਜ ਨੂੰ ਤਰਜੀਹੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਘੱਟ ਉਬਾਲਣ ਵਾਲੇ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਵਾਲੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।

1. ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਣ ਦੀ ਵਿਧੀ, ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਵਿਭਾਜਨ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿਧੀਆਂ: ਡਾਇਲਸਿਸ ਅਤੇ ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਇਹਨਾਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਤੀ ਵਿੱਚੋਂ ਲੰਘਣ ਲਈ ਕਰਦੇ ਹਨ ਜੋ ਅਰਧ-ਪਰਮੇਮੇਬਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿੱਚੋਂ ਨਹੀਂ ਲੰਘ ਸਕਦੇ;ਘਣਤਾ ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਮਾਧਿਅਮ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਗੁਣਵੱਤਾ ਅਤੇ ਘਣਤਾ ਦਾ ਕਣਾਂ 'ਤੇ ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੋਵੇਗਾ।ਨਿਪਟਾਉਣ ਦੀ ਗਤੀ ਤੇਜ਼ ਹੈ;ਜੈੱਲ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਕਾਲਮ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਹੈ।

2. ਵਰਤੋਂ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ ਦੇ ਅੰਤਰ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨਾ: ਇਲੈਕਟ੍ਰੋ-ਵਰਖਾ ਕਿਉਂਕਿ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਣੂਆਂ ਦਾ ਸ਼ੁੱਧ ਚਾਰਜ ਜ਼ੀਰੋ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂ 'ਤੇ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਣੂਆਂ ਵਿਚਕਾਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਇਕੱਠਾ ਕਰਨਾ ਆਸਾਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਘੱਟੋ ਘੱਟ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ;ਲੂਣ ਦੇ ਘੋਲ ਨਾਲ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਨਮਕ ਦਾ ਘੋਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦਾ ਜਾਂ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ।

3. ਚਾਰਜ ਨੂੰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਮੁੱਖ ਸਮੱਗਰੀ ਵਿੱਚ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਅਤੇ ਆਇਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

4. ਦੇ ਢੰਗਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦਾ ਚੋਣਤਮਕ ਸੋਸ਼ਣ ਅਤੇ ਵੱਖ ਹੋਣਾ ਕਣ ਸੋਸ਼ਣ ਦੀ ਤਾਕਤ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ।

5. ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਲਿਗੈਂਡਸ ਦੇ ਵੱਖ ਹੋਣ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ।ਇਹ ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਲਿਗੈਂਡ ਨਾਮਕ ਕਿਸੇ ਹੋਰ ਅਣੂ ਨਾਲ ਸਹਿ-ਸਹਿਯੋਗੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਜੋੜਨ ਦੀ ਬਜਾਏ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਬੰਨ੍ਹਣ ਦੀ ਆਗਿਆ ਦਿੰਦੀ ਹੈ।

6. ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਦਾ ਤਰੀਕਾ: ਘੱਟ-ਤਾਪਮਾਨ ਵਾਲੇ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਵਾਲੇ ਵਰਖਾ ਵਿਧੀ: ਜ਼ਿਆਦਾਤਰ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵਰਖਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ ਜੋ ਪਾਣੀ ਨਾਲ ਮਿਲਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਮੀਥੇਨੌਲ, ਈਥਾਨੌਲ।ਇਹ ਵਿਧੀ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਸਲਟਿੰਗ ਆਊਟ ਨਾਲੋਂ ਵੱਧ ਹੈ, ਪਰ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਜ਼ਿਆਦਾ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ ਜਦੋਂ ਆਸਾਨ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਇਹ ਘੱਟ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।

ਕਿਵੇਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨਾ ਹੈਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ:

ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨਾ ਹੈ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਇੱਕ ਵੱਡਾ ਅਣੂ ਹੈ, ਅਤੇ ਐਲਬਿਊਮਿਨ ਦੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਅਣੂ ਅਕਾਰ ਹਨ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਛੋਟੇ ਅਣੂ ਪਦਾਰਥਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਕੁਝ ਸਰਲ ਤਰੀਕੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਵੀ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।ਵੱਖ-ਵੱਖ ਅਣੂ ਆਕਾਰਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੇ ਮੁੱਖ ਤਰੀਕੇ ਹਨ ਡਾਇਲਸਿਸ, ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ, ਜੈੱਲ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ, ਅਤੇ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗਲ ਵਿਭਾਜਨ।ਡਾਇਲਸਿਸ ਅਤੇ ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਵੱਖ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਡਾਇਲਸਿਸ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਇੱਕ ਅਰਧ-ਪਰਮੇਬਲ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਬਣੇ ਇੱਕ ਡਾਇਲਸਿਸ ਬੈਗ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਡਾਇਲਸਿਸ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਡੁਬੋਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਪਾਣੀ ਅਤੇ ਹੋਰ ਛੋਟੇ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਅਰਧ-ਪਰਮੇਮੇਬਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿੱਚ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗਲ ਬਲ ਜਾਂ ਦਬਾਅ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਅਤੇ ਅਰਧ-ਪਰਦੇਸ਼ੀਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਫਸਾਉਣ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ।ਇਨ੍ਹਾਂ ਦੋ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰੋਟੀਨ-ਅਧਾਰਤ ਮੈਕਰੋਮੋਲੀਕਿਊਲਸ ਅਤੇ ਅਜੈਵਿਕ ਲੂਣ-ਅਧਾਰਿਤ ਛੋਟੇ ਅਣੂਆਂ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਹਨਾਂ ਨੂੰ ਅਕਸਰ ਲੂਣ ਕੱਢਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਲੂਣ ਭੰਗ ਕਰਨ ਦੇ ਢੰਗ ਨਾਲ ਜੋੜ ਕੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਅਜੈਵਿਕ ਲੂਣ ਘੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਮਕ ਕੱਢਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਇਹਨਾਂ ਦੋ ਤਰੀਕਿਆਂ ਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢਣ ਲਈ ਪੇਸ਼ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

1. ਲੂਣ ਕੱਢਣ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇ: ਨਮਕ ਕੱਢਣ ਦੀ ਵਿਧੀ ਦਾ ਆਧਾਰ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਲੂਣ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਵਾਧੇ ਨਾਲ ਪਤਲੇ ਨਮਕ ਦੇ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ ਵਧ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਪਰ ਜਦੋਂ ਲੂਣ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਇੱਕ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਮੁੱਲ ਤੱਕ ਵਧ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਪਾਣੀ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਵਧਾਈ ਜਾਵੇਗੀ।ਘਟਣਾ, ਜੋ ਬਦਲੇ ਵਿੱਚ ਕੁਝ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਅਣੂ ਬਣਤਰ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ ਦੁਆਰਾ ਚਾਰਜ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਨਿਰਪੱਖ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਹਾਈਡਰੇਸ਼ਨ ਝਿੱਲੀ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਨਸ਼ਟ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਆਖਰਕਾਰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਅਣੂਆਂ ਨੂੰ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਹੱਲਾਂ ਤੋਂ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਅਤੇ ਪ੍ਰਸਾਰਿਤ ਕਰਨ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੀ ਹੈ।

2. ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਵਾਲਾ ਵਰਖਾ ਵਿਧੀ: ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਦੇ ਦੋ ਕਾਰਨ ਹਨ: ਡੀਹਾਈਡਰੇਸ਼ਨ ਨਾਲ ਲੂਣ ਦੇ ਘੋਲ ਵਜੋਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨਾ ਹੈ;ਦੂਜਾ, ਧਰੁਵੀ ਘੋਲਨ ਵਿੱਚ ਪਾਣੀ ਨਾਲੋਂ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਦਾ ਡਾਈਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਸਥਿਰਾਂਕ ਘਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

3. ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਪ੍ਰੀਪਿਟੇਟਿੰਗ ਏਜੰਟ: ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਇੱਕ ਪ੍ਰਕਿਰਤੀ ਏਜੰਟ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਸਿਰਫ ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਜਾਂ ਇੱਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵਰਖਾ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਆਮ ਹਨ ਖਾਰੀ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਲੈਕਟਿਨ, ਅਤੇ ਭਾਰੀ ਧਾਤਾਂ।

4. ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ ਵਰਖਾ: ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਗੈਰ-ਆਓਨਿਕ ਪੋਲੀਮਰਾਂ ਨੂੰ ਕਿਵੇਂ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨਾ ਹੈਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ ਅਤੇ ਸੋਡੀਅਮ ਡੈਕਸਟ੍ਰਾਨ ਸਲਫੇਟ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਤੇਜ਼ ਕਰਨ ਲਈ।