De skieding en suvering fan aaiwiten wurdt in protte brûkt yn biogemy ûndersyk en tapassing en is in wichtige operasjonele feardigens.In typyske eukaryotyske sel kin tûzenen ferskillende aaiwiten befetsje, guon binne tige ryk en guon befetsje mar in pear eksimplaren.Om te studearjen in bepaaldeproteïne, It is needsaaklik om earst it proteïne te reinigjen fan oare proteïnen en net-proteinmolekulen.

1. Salting-out metoade fanproteïne:

Neutraal sâlt hat in signifikant effekt op de oplosberens fan proteïne.Yn 't algemien, mei de ferheging fan sâltkonsintraasje ûnder lege sâltkonsintraasje, nimt de oplosberens fan proteïne ta.Dit hjit sâltsjen;doe't it sâlt konsintraasje bliuwt te fergrutsjen, De oplosberens fan aaiwyt nimt ôf yn wikseljende graden en skiedt út iene nei de oare.Dit ferskynsel wurdt útsalting neamd.

2. Isoelektryske puntstapelmetoade:

De elektrostatyske ôfwiking tusken dieltsjes is it lytsst as it aaiwyt statysk is, sadat de oplosberens ek it lytst is.De isoelektryske punten fan ferskate aaiwiten binne oars.De pH fan 'e kondysjonele oplossing kin brûkt wurde om it isoelektryske punt fan in proteïne te berikken.

3.Dialysis en ultrafiltraasje:

Dialyse brûkt in semi-permeabel membraan om aaiwiten fan ferskate molekulêre grutte te skieden.De ultrafiltraasjemetoade brûkt hege druk as sintrifugale krêft om wetter en oare lytse oploste molekulen troch in semi-permeabel membraan te gean, wylst deproteïnebliuwt op it membraan.Jo kinne ferskate poargrutten kieze om proteïnen fan ferskate molekulêre gewichten te ûnderskeppen.

4.Gelfiltraasjemetoade:

Ek neamd grutte útsluting chromatography of molekulêre sieve chromatography, dit is ien fan de meast brûkbere metoaden foar it skieden fan aaiwyt mengsels neffens molekulêre grutte.De meast brûkte ferpakkingsmaterialen yn 'e kolom binne glukoazegel (Sephadex ged) en agarosegel (agarosegel).

5. Elektroforese:

Under deselde pH-betingsten kinne ferskate aaiwiten wurde skieden fanwege har ferskillende molekulêre gewichten en ferskillende ladingen yn it elektryske fjild.It is de muoite wurdich beteljen omtinken oan isoelectric set electrophoresis, dy't brûkt in ampholyte as drager.Tidens elektrophoresis foarmet de ampholyte in pH-gradient stadichoan tafoege fan 'e positive elektrode nei de negative elektrode.As it aaiwyt mei in bepaalde lading deryn swimt, sil it elkoar berikke.De pH-posysje fan it elektryske punt is diskontinu, en dizze metoade kin brûkt wurde om ferskate aaiwiten te analysearjen en te meitsjen.

6.Ionkommunikaasjechromatografy:

ionkommunikaasjemiddels omfetsje kationyske kommunikaasjemiddels (lykas carboxymethylcellulose; CM-cellulose) en anionyske kommunikaasjemiddels (diethylaminoethylcellulose).By it trochjaan fan 'e ionkommunikaasjechromatografykolom wurdt it proteïne mei de tsjinoerstelde lading oan' e ionkommunikaasjemiddel op 'e ionkommunikaasjemiddel geadsorbeerd, en dan it adsorbearreproteïnewurdt eluearre troch it feroarjen fan de pH of ionyske sterkte.

7. Affiniteitskromatografy:

Affiniteitschromatografy is in ekstreem nuttige metoade foar it skieden fan aaiwiten.It fereasket faak mar ien stap om in bepaald proteïne te skieden fan in rommelich proteïnemingsel mei hege suverens.

Dizze metoade is basearre op de spesifike earder as kovalente bining fan bepaalde aaiwiten oan in oare molekule neamd in ligand (Ligand).

It basisprinsipe:

aaiwiten bestean yn in rommelich mingsel yn weefsels as sellen, en elk type sel befettet tûzenen ferskillende aaiwiten.Dêrom is it ûnderskied tusken aaiwiten in wichtich ûnderdiel fan biogemy, en it hat net allinich west.Of in set fan klearmakke metoaden kin elke soart proteïne fuortsmite fan in rommelich mingd proteïne, dus ferskate metoaden wurde faak brûkt yn kombinaasje.