ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ପୃଥକତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ଜ oc ବ ରସାୟନ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏବଂ ପ୍ରୟୋଗରେ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ଏବଂ ଏହା ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ କାର୍ଯ୍ୟକ୍ଷମ ଦକ୍ଷତା |ଏକ ସାଧାରଣ ଇଉକାରିଓଟିକ୍ କୋଷରେ ହଜାରେ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ରହିପାରେ, କେତେକ ଅତ୍ୟଧିକ ଧନୀ ଏବଂ କେତେକରେ କେବଳ କିଛି କପି ରହିଥାଏ |ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବାକୁ |ପ୍ରୋଟିନ୍ |, ପ୍ରଥମେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅନ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ଅଣ-ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅଣୁରୁ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ |

1. ସଲ୍ଟ ଆଉଟ୍ ପଦ୍ଧତି |ପ୍ରୋଟିନ୍ |:

ପ୍ରୋଟିନର ଦ୍ରବଣ ଉପରେ ନିରପେକ୍ଷ ଲୁଣର ମହତ୍ effect ପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଭାବ ରହିଛି |ସାଧାରଣତ low, କମ୍ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା ତଳେ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା ବୃଦ୍ଧି ସହିତ ପ୍ରୋଟିନର ଦ୍ରବଣୀୟତା ବ increases ିଥାଏ |ଏହାକୁ ଲୁଣ କୁହାଯାଏ;ଯେତେବେଳେ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା ବ continues ିବାରେ ଲାଗେ, ପ୍ରୋଟିନର ଦ୍ରବଣ ବିଭିନ୍ନ ସ୍ତରରେ କମିଯାଏ ଏବଂ ଗୋଟିଏ ପରେ ଗୋଟିଏ ଅଲଗା ହୋଇଯାଏ |ଏହି ଘଟଣାକୁ ସଲ୍ଟ ଆଉଟ୍ କୁହାଯାଏ |

2. ଆଇସୋଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ପଏଣ୍ଟ ଷ୍ଟାକିଂ ପଦ୍ଧତି:

ପ୍ରୋଟିନ୍ ସ୍ଥିର ଥିବାବେଳେ କଣିକା ମଧ୍ୟରେ ଥିବା ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ଘୃଣା ସବୁଠାରୁ କ୍ଷୁଦ୍ର ଅଟେ, ତେଣୁ ଦ୍ରବଣ ମଧ୍ୟ କ୍ଷୁଦ୍ର ଅଟେ |ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନର ଆଇସୋଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ପଏଣ୍ଟ ଭିନ୍ନ ଅଟେ |ଏକ ପ୍ରୋଟିନର ଆଇସୋଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ପଏଣ୍ଟରେ ପହଞ୍ଚିବା ପାଇଁ କଣ୍ଡିସନର ସଲ୍ୟୁସନ୍ ର pH ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ, କିନ୍ତୁ ଏହି ପଦ୍ଧତି କ୍ୱଚିତ୍ ଏକାକୀ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ଏବଂ ଲୁଣ-ଆଉଟ୍ ପଦ୍ଧତି ସହିତ ମିଳିତ ହୋଇପାରେ |

3. ଡାଏଲିସିସ୍ ଏବଂ ଅଲ୍ଟ୍ରାଫିଲଟ୍ରେସନ୍:

ବିଭିନ୍ନ ମଲିକୁଲାର ଆକାରର ପ୍ରୋଟିନକୁ ଅଲଗା କରିବା ପାଇଁ ଡାୟଲିସିସ୍ ଏକ ଅର୍ଦ୍ଧ-ବିସ୍ତାରିତ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ |ଅଲ୍ଟ୍ରାଫିଲଟ୍ରେସନ୍ ପଦ୍ଧତି ଉଚ୍ଚ ଚାପ କିମ୍ବା ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗୁଲ୍ ଫୋର୍ସ ବ୍ୟବହାର କରି ଜଳ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଛୋଟ ସଲ୍ୟୁଟ୍ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଅର୍ଦ୍ଧ-ବିସ୍ତାରଯୋଗ୍ୟ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଦେଇ ଗତି କରିଥାଏ |ପ୍ରୋଟିନ୍ |br ୁଲା ଉପରେ ରହିଥାଏ |ବିଭିନ୍ନ ମଲିକୁଲାର ଓଜନର ପ୍ରୋଟିନକୁ ଅଟକାଇବା ପାଇଁ ଆପଣ ବିଭିନ୍ନ ଖୋଲା ଆକାର ବାଛିପାରିବେ |

4. ଗେଲ ଫିଲ୍ଟରେସନ୍ ପଦ୍ଧତି:

ସାଇଜ୍ ଏକ୍ସକ୍ଲୁସନ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି କିମ୍ବା ମଲିକୁଲାର୍ ସାଇଭ୍ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ମଧ୍ୟ କୁହାଯାଏ, ମଲିକୁଲାର୍ ଆକାର ଅନୁଯାୟୀ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମିଶ୍ରଣକୁ ପୃଥକ କରିବା ପାଇଁ ଏହା ଅନ୍ୟତମ ଉପଯୋଗୀ ପଦ୍ଧତି |ସ୍ତମ୍ଭରେ ଅଧିକ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ୟାକିଂ ସାମଗ୍ରୀଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ ଜେଲ୍ (ସେଫେଡେକ୍ସ ଗେଡ୍) ଏବଂ ଆଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ (ଆଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍) |

5. ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍:

ସମାନ pH ଅବସ୍ଥାରେ, ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅଲଗା ଅଲଗା ଅଲଗା ଓଜନ ଏବଂ ବ electric ଦ୍ୟୁତିକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଭିନ୍ନ ଚାର୍ଜ ହେତୁ ଅଲଗା ହୋଇପାରେ |ଆଇସୋଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ସେଟ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପ୍ରତି ଧ୍ୟାନ ଦେବା ଉଚିତ୍, ଯାହା ଏକ ବାହକ ଭାବରେ ଏକ ଆମ୍ଫୋଲାଇଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ |ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ସମୟରେ, ଆମ୍ଫୋଲାଇଟ୍ ଏକ pH ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ ଯାହା ଧୀରେ ଧୀରେ ସକରାତ୍ମକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡରୁ ନକାରାତ୍ମକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡରେ ଯୋଡି ହୋଇଗଲା |ଯେତେବେଳେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଚାର୍ଜ ଥିବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏଥିରେ ପହଁରିଯାଏ, ଏହା ପରସ୍ପର ପାଖରେ ପହଞ୍ଚିବ |ବ electrical ଦୁତିକ ବିନ୍ଦୁର pH ସ୍ଥିତି ନିରନ୍ତର, ଏବଂ ଏହି ପଦ୍ଧତିକୁ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |

6. ଆଇନ୍ ଯୋଗାଯୋଗ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି:

ଆୟନ ଯୋଗାଯୋଗ ଏଜେଣ୍ଟଗୁଡ଼ିକରେ କ୍ୟାଟେନିକ୍ ଯୋଗାଯୋଗ ଏଜେଣ୍ଟ (ଯେପରିକି କାର୍ବକ୍ସାଇମେଥାଇଲ୍ ସେଲୁଲୋଜ୍; ସିଏମ୍-ସେଲୁଲୋଜ୍) ଏବଂ ଆୟନିକ୍ ଯୋଗାଯୋଗ ଏଜେଣ୍ଟ (ଡାଏଥାଇଲିମିନୋଥାଇଲ୍ ସେଲୁଲୋଜ୍) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଆୟନ ଯୋଗାଯୋଗ କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ସ୍ତମ୍ଭ ଦେଇ ଯିବାବେଳେ, ଆୟନ ଯୋଗାଯୋଗ ଏଜେଣ୍ଟକୁ ବିପରୀତ ଚାର୍ଜ ଥିବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଆୟନ ଯୋଗାଯୋଗ ଏଜେଣ୍ଟରେ ଆଡର୍ସଡ୍ ହୁଏ, ଏବଂ ତା’ପରେ ଆଡ୍ସର୍ବେଡ୍ |ପ୍ରୋଟିନ୍ |pH କିମ୍ବା ଆୟୋନିକ୍ ଶକ୍ତି ପରିବର୍ତ୍ତନ କରି ଉଚ୍ଚାରଣ କରାଯାଏ |

7. ଆଫିନିଟି କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି:

ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅଲଗା କରିବା ପାଇଁ ଆଫିନିଟି କ୍ରୋମାଟୋଗ୍ରାଫି ଏକ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଉପଯୋଗୀ ପଦ୍ଧତି |ଉଚ୍ଚ ଶୁଦ୍ଧତା ସହିତ ଏକ ବିଶୃଙ୍ଖଳିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମିଶ୍ରଣରୁ ଶୁଦ୍ଧ ହେବା ପାଇଁ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅଲଗା କରିବା ପାଇଁ ଏହା କେବଳ ଗୋଟିଏ ପଦକ୍ଷେପ ଆବଶ୍ୟକ କରେ |

ଏହି ପଦ୍ଧତି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉପରେ ଲିଗାଣ୍ଡ୍ (ଲିଗାଣ୍ଡ୍) ନାମକ ଅନ୍ୟ ଅଣୁରେ କୋଭାଲାଣ୍ଟ ବାନ୍ଧିବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଉପରେ ଆଧାରିତ |

ମ basic ଳିକ ନୀତି:

ପ୍ରୋଟିନ୍ ଟିସୁ କିମ୍ବା କୋଷରେ ଏକ ଅଶୁଭ ମିଶ୍ରଣରେ ବିଦ୍ୟମାନ, ଏବଂ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରକାରର କୋଷରେ ହଜାରେ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଥାଏ |ତେଣୁ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟରେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଜ oc ବ ରସାୟନର ଏକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଂଶ, ଏବଂ ଏହା ଏକାକୀ ହୋଇନାହିଁ |କିମ୍ବା ପ୍ରସ୍ତୁତ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକର ଏକ ସେଟ୍ ଏକ ବିଶୃଙ୍ଖଳିତ ମିଶ୍ରିତ ପ୍ରୋଟିନରୁ ଯେକ kind ଣସି ପ୍ରକାରର ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ, ତେଣୁ ଅନେକ ପଦ୍ଧତି ପ୍ରାୟତ combination ମିଳିତ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |