Úsáidtear scaradh agus íonú próitéiní go forleathan i dtaighde agus i gcur i bhfeidhm na bithcheimice agus is scil oibríochta tábhachtach é.Is féidir leis na mílte próitéiní éagsúla a bheith i gcill eicaryotic tipiciúil, tá cuid acu an-saibhir agus níl ach cúpla cóip i gcuid eile.D'fhonn staidéar a dhéanamh ar áirithepróitéin, is gá an próitéin a íonú ar dtús ó phróitéiní eile agus ó mhóilíní neamh-próitéine.

1. Modh salainn-amach depróitéin:

Tá tionchar suntasach ag salann neodrach ar intuaslagthacht próitéine.Go ginearálta, le méadú ar thiúchan salainn faoi thiúchan salainn íseal, méadaíonn tuaslagthacht próitéin.Tugtar sailleadh air seo;nuair a leanann an tiúchan salainn ag méadú, Laghdaíonn tuaslagthacht próitéin go céimeanna éagsúla agus scarann ​​​​sé amach ceann i ndiaidh a chéile.Tugtar sailleadh ar an bhfeiniméan seo.

2. Modh cruachta pointe isoelectric:

Is é an éaradh leictreastatach idir cáithníní an ceann is lú nuair a bhíonn an próitéin statach, agus mar sin is é an tuaslagthacht is lú freisin.Tá pointí isoelectric próitéiní éagsúla difriúil.Is féidir pH an tuaslagáin oiriúnaithe a úsáid chun pointe isoelectric próitéin a bhaint amach Déan é a charnadh, ach is annamh a úsáidtear an modh seo ina n-aonar agus is féidir é a chomhcheangal leis an modh sailleadh.

3.Dialysis agus ultrafiltration:

Úsáideann scagdhealú membrane leath-thréscaoilteach chun próitéiní de mhéideanna móilíneacha éagsúla a scaradh.Úsáideann an modh ultrafiltration brú ard nó fórsa lártheifeacha chun uisce agus móilíní tuaslagáit bheaga eile a dhéanamh trí membrane leath-thréscaoilteach, agus anpróitéinfós ar an membrane.Is féidir leat méideanna éagsúla pore a roghnú chun próitéiní de mheáchain mhóilíneacha éagsúla a thascradh.

Modh scagacháin 4.Gel:

Ar a dtugtar freisin crómatagrafaíocht eisiamh méide nó crómatagrafaíocht criathar mhóilíneach, is é seo ceann de na modhanna is úsáidí chun meascáin próitéine a scaradh de réir méid móilíneach.Is iad na hábhair phacála is coitianta a úsáidtear sa cholún ná glóthach glúcóis (Sephadex ged) agus glóthach agarose (glóthach agarose).

5.Leictreafóiréis:

Faoin gcoinníoll pH céanna, is féidir próitéiní éagsúla a scaradh mar gheall ar a gcuid meáchain mhóilíneacha éagsúla agus muirir éagsúla sa réimse leictreach.Is fiú aird a thabhairt ar leictreafóiréis socraithe isoelectric, a úsáideann ampholyte mar iompróir.Le linn leictreafóiréis, foirmíonn an t-amfailít grádán pH a chuirtear de réir a chéile ón leictreoid dhearfach go dtí an leictreoid diúltach.Nuair a shnámhann an próitéin le muirear áirithe ann, sroichfidh sé a chéile.Tá suíomh pH an phointe leictreach neamhleanúnach, agus is féidir an modh seo a úsáid chun próitéiní éagsúla a anailísiú agus a ullmhú.

Crómatagrafaíocht cumarsáide 6.Ion:

Áirítear le gníomhairí cumarsáide ian gníomhairí cumarsáide cationic (cosúil le ceallalóis carboxymethyl; CM-cellulose) agus gníomhairí cumarsáide anionic (ceallalós diethylaminoethyl).Nuair a bhíonn sé ag dul tríd an gcolún crómatagrafaíocht cumarsáide ian, déantar an próitéin a bhfuil an muirear os coinne leis an ngníomhaire cumarsáide ian a asaithe ar an ngníomhaire cumarsáide ian, agus ansin an adsorbedpróitéinTá sé eluted ag athrú an pH nó neart ianach.

Crómatagrafaíocht 7.Affinity:

Is modh thar a bheith úsáideach é crómatagrafaíocht chleamhnais chun próitéiní a scaradh.Is minic a éilíonn sé ach céim amháin chun próitéin áirithe a scaradh le íonú ó mheascán próitéin messy le íonacht ard.

Tá an modh seo bunaithe ar cheangal sonrach seachas comhfhiúsach próitéiní áirithe le móilín eile ar a dtugtar ligand (Ligand).

An bunphrionsabal:

próitéiní ann i meascán messy i fíocháin nó cealla, agus tá gach cineál cille na mílte próitéiní éagsúla.Mar sin, is cuid thábhachtach den bhithcheimic é an t-idirdhealú idir próitéiní, agus ní raibh sé ina n-aonar.Nó is féidir le sraith modhanna réidh de dhéantús an duine próitéin de chineál ar bith a bhaint de phróitéin mheasctha messy, mar sin is minic a úsáidtear roinnt modhanna i dteannta a chéile.