Ang pagbulag ug pagputli sa mga protina kaylap nga gigamit sa panukiduki ug aplikasyon sa biochemistry ug usa ka hinungdanon nga kahanas sa operasyon.Ang usa ka tipikal nga eukaryotic cell mahimong adunay sulod nga liboan ka lain-laing mga protina, ang uban adunahan kaayo ug ang uban adunay pipila lamang ka kopya.Aron makatuon sa usa ka pihoprotina, gikinahanglan nga limpyohan una ang protina gikan sa ubang mga protina ug dili protina nga mga molekula.

1. Salting-out nga paagi saprotina:

Ang neutral nga asin adunay dakong epekto sa solubility sa protina.Sa kinatibuk-an, sa pagtaas sa konsentrasyon sa asin ubos sa ubos nga konsentrasyon sa asin, ang solubility sa protina nagdugang.Gitawag kini nga asin;sa diha nga ang asin konsentrasyon nagpadayon sa pagdugang, Ang solubility sa protina mikunhod ngadto sa lain-laing mga ang-ang ug mibulag gikan sa usa ka human sa usa.Kini nga panghitabo gitawag nga salting out.

2. Isoelectric point stacking nga pamaagi:

Ang electrostatic repulsion tali sa mga partikulo mao ang pinakagamay kung ang protina static, mao nga ang solubility mao usab ang pinakagamay.Ang isoelectric nga mga punto sa lainlaing mga protina managlahi.Ang pH sa conditioning solution mahimong magamit aron maabot ang isoelectric nga punto sa usa ka protina Himoa kini nga matipon, apan kini nga pamaagi panagsa ra nga gigamit nga nag-inusara ug mahimong ikombinar sa salting-out nga pamaagi.

3. Dialysis ug ultrafiltration:

Ang dialysis naggamit ug semi-permeable membrane aron pagbulag sa mga protina nga lainlain ang gidak-on sa molekula.Ang ultrafiltration nga pamaagi naggamit sa taas nga presyur o centrifugal nga puwersa aron ang tubig ug uban pang gagmay nga mga molekula sa solute moagi sa usa ka semi-permeable membrane, samtang angprotinanagpabilin sa lamad.Makapili ka ug lain-laing mga gidak-on sa lungag aron ma-intercept ang mga protina nga lainlain ang gibug-aton sa molekula.

4.Gel filtration pamaagi:

Gitawag usab nga size exclusion chromatography o molecular sieve chromatography, kini usa sa labing mapuslanon nga mga pamaagi sa pagbulag sa mga sagol nga protina sumala sa gidak-on sa molekula.Ang mas sagad nga gigamit nga mga materyales sa pagputos sa kolum mao ang glucose gel (Sephadex ged) ug agarose gel (agarose gel).

5. Electrophoresis:

Ubos sa parehas nga kahimtang sa pH, ang lainlaing mga protina mahimong mabulag tungod sa lainlaing mga gibug-aton sa molekula ug lainlaing mga singil sa natad sa kuryente.Angayan nga hatagan pagtagad ang isoelectric set electrophoresis, nga naggamit sa usa ka ampholyte ingon usa ka carrier.Atol sa electrophoresis, ang ampholyte nagporma og pH gradient nga anam-anam nga gidugang gikan sa positibo nga electrode ngadto sa negatibo nga electrode.Kung ang protina nga adunay usa ka piho nga bayad molangoy niini, kini mag-abut sa usag usa.Ang pH nga posisyon sa elektrisidad nga punto walay hunong, ug kini nga pamaagi magamit sa pag-analisar ug pag-andam sa lainlaing mga protina.

6.Ion komunikasyon chromatography:

Ang mga ahente sa komunikasyon sa ion naglakip sa mga ahente sa komunikasyon sa cationic (sama sa carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) ug mga ahente sa komunikasyon nga anionic (diethylaminoethyl cellulose).Kung moagi sa kolum sa chromatography sa komunikasyon sa ion, ang protina nga adunay kaatbang nga bayad sa ahente sa komunikasyon sa ion gi-adsorbed sa ahente sa komunikasyon sa ion, ug dayon ang adsorbedprotinaang eluted pinaagi sa pagbag-o sa pH o ionic nga kusog.

7. Affinity chromatography:

Ang affinity chromatography usa ka labi ka mapuslanon nga pamaagi sa pagbulag sa mga protina.Kini kasagaran nagkinahanglan lamang og usa ka lakang sa pagbulag sa usa ka protina aron maputli gikan sa usa ka gubot nga sagol nga protina nga adunay taas nga kaputli.

Kini nga pamaagi gibase sa espesipiko kay sa covalent nga pagbugkos sa pipila ka mga protina ngadto sa laing molekula nga gitawag ug ligand (Ligand).

Ang sukaranan nga prinsipyo:

ang mga protina anaa sa usa ka gubot nga sagol sa mga tisyu o mga selula, ug ang matag matang sa selula adunay liboan ka lain-laing mga protina.Busa, ang kalainan tali sa mga protina usa ka importante nga bahin sa biochemistry, ug kini wala mag-inusara.O usa ka hugpong sa andam nga mga pamaagi mahimo’g makuha ang bisan unsang klase sa protina gikan sa usa ka gubot nga sinagol nga protina, mao nga daghang mga pamaagi ang kanunay nga gigamit sa kombinasyon.