ການແຍກແລະການເຮັດຄວາມສະອາດຂອງທາດໂປຼຕີນແມ່ນຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການຄົ້ນຄວ້າແລະການນໍາໃຊ້ທາງຊີວະເຄມີແລະເປັນທັກສະການດໍາເນີນງານທີ່ສໍາຄັນ.ຈຸລັງ eukaryotic ປົກກະຕິສາມາດບັນຈຸທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍພັນຊະນິດ, ບາງຊະນິດອຸດົມສົມບູນຫຼາຍແລະບາງຊະນິດມີພຽງສອງສາມຕົວເທົ່ານັ້ນ.ໃນຄໍາສັ່ງທີ່ຈະສຶກສາສະເພາະໃດຫນຶ່ງໂປຣຕີນ, ມັນເປັນສິ່ງຈໍາເປັນທໍາອິດທີ່ຈະຊໍາລະທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນແລະໂມເລກຸນທີ່ບໍ່ແມ່ນທາດໂປຼຕີນອື່ນໆ.
1. ວິທີການເກືອອອກຂອງໂປຣຕີນ:
ເກືອທີ່ເປັນກາງມີຜົນກະທົບທີ່ສໍາຄັນຕໍ່ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນ.ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ດ້ວຍການເພີ່ມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເກືອພາຍໃຕ້ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເກືອຕ່ໍາ, ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນເພີ່ມຂຶ້ນ.ອັນນີ້ເອີ້ນວ່າ salting;ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງເກືອຍັງສືບຕໍ່ເພີ່ມຂື້ນ, ການລະລາຍຂອງທາດໂປຼຕີນຫຼຸດລົງໃນລະດັບທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະແຍກອອກຈາກກັນ.ປະກົດການນີ້ເອີ້ນວ່າ salting ອອກ.
2. ວິທີການ stacking ຈຸດ isoelectric:
ການ repulsion electrostatic ລະຫວ່າງ particles ແມ່ນນ້ອຍທີ່ສຸດໃນເວລາທີ່ທາດໂປຼຕີນແມ່ນ static, ສະນັ້ນການລະລາຍແມ່ນຍັງນ້ອຍທີ່ສຸດ.ຈຸດ isoelectric ຂອງທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ.pH ຂອງການແກ້ໄຂປັບສະພາບສາມາດນໍາໃຊ້ເພື່ອບັນລຸຈຸດ isoelectric ຂອງທາດໂປຼຕີນທີ່ເຮັດໃຫ້ມັນສະສົມ, ແຕ່ວິທີການນີ້ແມ່ນບໍ່ຄ່ອຍໄດ້ນໍາໃຊ້ຢ່າງດຽວແລະສາມາດລວມເຂົ້າກັບວິທີການອອກເກືອ.
3.ການລ້າງອາກາດແລະ ultrafiltration:
Dialysis ໃຊ້ເຍື່ອເຄິ່ງ permeable ເພື່ອແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຂະຫນາດໂມເລກຸນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ວິທີການ ultrafiltration ໃຊ້ຄວາມກົດດັນສູງຫຼືຜົນບັງຄັບໃຊ້ centrifugal ເພື່ອເຮັດໃຫ້ນ້ໍາແລະໂມເລກຸນລະລາຍຂະຫນາດນ້ອຍອື່ນໆຜ່ານເຍື່ອ semi-permeable, ໃນຂະນະທີ່ໂປຣຕີນຍັງຄົງຢູ່ໃນເຍື່ອ.ທ່ານສາມາດເລືອກເອົາຂະຫນາດ pore ທີ່ແຕກຕ່າງກັນເພື່ອຂັດຂວາງໂປຣຕີນຂອງນ້ໍາໂມເລກຸນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.
4.Gel ວິທີການກອງ:
ຍັງເອີ້ນວ່າ chromatography ການຍົກເວັ້ນຂະຫນາດຫຼື chromatography sieve ໂມເລກຸນ, ນີ້ແມ່ນຫນຶ່ງໃນວິທີການທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ສຸດສໍາລັບການແຍກປະສົມທາດໂປຼຕີນຕາມຂະຫນາດໂມເລກຸນ.ວັດສະດຸຫຸ້ມຫໍ່ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປຫຼາຍໃນຖັນແມ່ນ Glucose gel (Sephadex ged) ແລະ gel agarose (gel agarose).
5. electrophoresis:
ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂ pH ດຽວກັນ, ທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆສາມາດແຍກອອກໄດ້ເນື່ອງຈາກນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນທີ່ແຕກຕ່າງກັນແລະຄ່າບໍລິການທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ.ມັນເປັນມູນຄ່າທີ່ຈະເອົາໃຈໃສ່ກັບຊຸດ isoelectric electrophoresis, ເຊິ່ງໃຊ້ ampholyte ເປັນຜູ້ໃຫ້ບໍລິການ.ໃນລະຫວ່າງການ electrophoresis, ampholyte ປະກອບເປັນ gradient pH ຄ່ອຍໆເພີ່ມຈາກ electrode ບວກໄປຫາ electrode ລົບ.ເມື່ອທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄ່າທີ່ແນ່ນອນລອຍຢູ່ໃນມັນ, ມັນຈະເຂົ້າຫາກັນ.ຕໍາແຫນ່ງ pH ຂອງຈຸດໄຟຟ້າແມ່ນບໍ່ຕໍ່ເນື່ອງ, ແລະວິທີການນີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເພື່ອວິເຄາະແລະກະກຽມທາດໂປຼຕີນຕ່າງໆ.
6.Ion chromatography ການສື່ສານ:
ຕົວແທນການສື່ສານ ion ປະກອບມີຕົວແທນການສື່ສານ cationic (ເຊັ່ນ: carboxymethyl cellulose; CM-cellulose) ແລະຕົວແທນການສື່ສານ anionic (diethylaminoethyl cellulose).ເມື່ອຜ່ານຖັນ chromatography ການສື່ສານ ion, ທາດໂປຼຕີນທີ່ມີຄ່າກົງກັນຂ້າມກັບຕົວແທນການສື່ສານ ion ຈະຖືກດູດຊຶມຢູ່ໃນຕົວແທນການສື່ສານ ion, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນ adsorbed.ໂປຣຕີນແມ່ນ eluted ໂດຍການປ່ຽນແປງ pH ຫຼືຄວາມເຂັ້ມແຂງ ionic.
7.Affinity chromatography:
Affinity chromatography ເປັນວິທີທີ່ເປັນປະໂຫຍດທີ່ສຸດສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນ.ມັນມັກຈະຕ້ອງການພຽງແຕ່ຂັ້ນຕອນດຽວເພື່ອແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ແນ່ນອນເພື່ອເຮັດຄວາມສະອາດຈາກການປະສົມທາດໂປຼຕີນທີ່ສັບສົນທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງ.
ວິທີການນີ້ແມ່ນອີງໃສ່ສະເພາະແທນທີ່ຈະເປັນການຜູກມັດ covalent ຂອງທາດໂປຼຕີນບາງຢ່າງກັບໂມເລກຸນອື່ນທີ່ເອີ້ນວ່າ ligand (Ligand).
ຫຼັກການພື້ນຖານ:
ທາດໂປຼຕີນມີຢູ່ໃນສ່ວນປະສົມທີ່ສັບສົນຢູ່ໃນເນື້ອເຍື່ອຫຼືຈຸລັງ, ແລະແຕ່ລະປະເພດຂອງເຊນປະກອບດ້ວຍທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍພັນຊະນິດ.ດັ່ງນັ້ນ, ຄວາມແຕກຕ່າງລະຫວ່າງທາດໂປຼຕີນແມ່ນສ່ວນຫນຶ່ງທີ່ສໍາຄັນຂອງຊີວະເຄມີ, ແລະມັນບໍ່ໄດ້ຢູ່ຄົນດຽວ.ຫຼືຊຸດຂອງວິທີການທີ່ກຽມພ້ອມສາມາດເອົາທາດໂປຼຕີນຈາກທາດໂປຼຕີນທີ່ປະສົມທີ່ສັບສົນ, ດັ່ງນັ້ນວິທີການຈໍານວນຫຼາຍມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ໃນການປະສົມປະສານ.
ເວລາປະກາດ: ວັນທີ 05-05-2020