Jaká je metoda čištěnísystém čištění proteinů?Je nutné znát kódující sekvenci DNA purifikovaného proteinu, vidět, které buňky nebo tkáně jsou nadměrně exprimovány v cílovém genu, a navrhnout genové primery pro amplifikaci arf cílového fragmentu DNA.Jedná se o tzv. získávání fragmentů cílových genů.

Konstrukce expresního vektoru: V prokaryotickém nebo eukaryotickém expresním vektoru s charakteristikami samotné získané genové exprese je hlavním problémem tohoto kroku konstrukce plazmidu a požadovaného genu a expresního systému.Doba prokaryotické exprese je krátká, náklady jsou nízké a prioritou je velké množství exprese;gen není exprimován v E. coli a problém nastává v optimalizaci kodonů.S ohledem na lepší aktivitu a čištění proteinu se vědci rozhodli exprimovat v kvasinkách Pichi.Úspěšná exprese optimalizace kodonů je důležitá.

Jaká je metoda čištění systému čištění proteinů:

1. Srážky.

2. Elektroforéza: Nabitý protein je výše nebo níže než jeho izoelektrický bod a lze jej přesunout na zápornou nebo kladnou elektrodu elektrického pole v elektrickém poli.Podpora filmové elektroforézy, elektroforézy atd.

3. Dialýza: Metoda, která využívá dva dialyzační vaky k oddělení velkých molekul od proteinů a malých molekulárních organických sloučenin.

4. Chromatografie: Iontoměničová chromatografie využívá volných vlastností proteinů.Při specifickém pH jsou náboje a vlastnosti proteinů různé a lze je oddělit iontoměničovou chromatografií.Při anexové chromatografii se nejprve eluují proteiny s nízkou negativní silou.Molekulární síta, známá také jako gelová filtrace.Malé bílkoviny vstupují do pórů a zůstávají v nich dlouhou dobu.Velké proteiny nemohou vstupovat do pórů a vytékat přímo ven.

5. Jaká je metoda čištěnísystém čištění proteinů?Ultracentrifugace: Čištění proteinu lze použít ke stanovení molekulové hmotnosti a lze jej použít jako protein.Odděluje se tvorba proteinů s různou hustotou.