ची शुद्धीकरण पद्धत काय आहेप्रथिने शुद्धीकरण प्रणाली?शुद्ध केलेल्या प्रथिनांचा कोडिंग डीएनए क्रम जाणून घेणे, लक्ष्य जनुकामध्ये कोणत्या पेशी किंवा ऊती जास्त प्रमाणात व्यक्त होतात हे पाहणे आणि लक्ष्यित डीएनए तुकड्याचे एआरएफ वाढविण्यासाठी जीन प्राइमर्स डिझाइन करणे आवश्यक आहे.हे लक्ष्य जनुक तुकड्यांचे तथाकथित संपादन आहे.

अभिव्यक्ती वेक्टरची रचना: प्राप्त जनुक अभिव्यक्तीच्या वैशिष्ट्यांसह प्रोकेरियोटिक किंवा युकेरियोटिक अभिव्यक्ती वेक्टरमध्ये, या चरणाची मुख्य समस्या म्हणजे प्लाझमिड आणि स्वारस्य जनुक आणि अभिव्यक्ती प्रणाली तयार करणे.प्रोकेरियोटिक अभिव्यक्ती वेळ लहान आहे, खर्च कमी आहे आणि मोठ्या प्रमाणात अभिव्यक्ती प्राधान्य आहे;जनुक E. coli मध्ये व्यक्त होत नाही आणि कोडॉन ऑप्टिमायझेशनमध्ये समस्या उद्भवते.प्रथिनांच्या चांगल्या क्रियाकलाप आणि शुद्धीकरणाच्या विचारात, संशोधकांनी पिची यीस्टमध्ये व्यक्त करणे निवडले.कोडॉन ऑप्टिमायझेशनची यशस्वी अभिव्यक्ती महत्त्वपूर्ण आहे.

प्रथिने शुद्धीकरण प्रणालीची शुद्धीकरण पद्धत काय आहे:

1. पर्जन्य.

2. इलेक्ट्रोफोरेसीस: चार्ज केलेले प्रथिन त्याच्या समविद्युत बिंदूपेक्षा जास्त किंवा कमी असते आणि ते विद्युत क्षेत्राच्या नकारात्मक इलेक्ट्रोडवर किंवा विद्युत क्षेत्राच्या सकारात्मक इलेक्ट्रोडमध्ये हलविले जाऊ शकते.सपोर्ट फिल्म इलेक्ट्रोफोरेसीस, इलेक्ट्रोफोरेसीस इ.

3. डायलिसिस: प्रथिने आणि लहान आण्विक सेंद्रिय संयुगे पासून मोठे रेणू वेगळे करण्यासाठी दोन डायलिसिस पिशव्या वापरणारी पद्धत.

4. क्रोमॅटोग्राफी: आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफी प्रथिनांचे मुक्त गुणधर्म वापरते.विशिष्ट पीएच अंतर्गत, प्रथिनांचे शुल्क आणि गुणधर्म भिन्न असतात आणि ते आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीद्वारे वेगळे केले जाऊ शकतात.आयन एक्सचेंज क्रोमॅटोग्राफीमध्ये, कमी नकारात्मक शक्ती असलेले प्रथिने प्रथम बाहेर काढले जातात.आण्विक चाळणी, ज्याला जेल फिल्टरेशन देखील म्हणतात.लहान प्रथिने छिद्रांमध्ये प्रवेश करतात आणि त्यांच्यामध्ये बराच काळ राहतात.मोठी प्रथिने छिद्रांमध्ये प्रवेश करू शकत नाहीत आणि थेट बाहेर वाहू शकत नाहीत.

5. शुद्धीकरण पद्धत काय आहेप्रथिने शुद्धीकरण प्रणाली?अल्ट्रासेंट्रीफ्यूगेशन: प्रथिने शुद्धीकरणाचा वापर आण्विक वजन निर्धारित करण्यासाठी केला जाऊ शकतो आणि प्रथिने म्हणून वापरला जाऊ शकतो.वेगवेगळ्या घनतेसह प्रथिनांची निर्मिती विभक्त केली जाते.