Quelle est la méthode de purification dusystème de purification des protéines?Il est nécessaire de connaître la séquence d'ADN codante de la protéine purifiée, de voir quelles cellules ou quels tissus sont surexprimés dans le gène cible et de concevoir des amorces géniques pour amplifier l'arf du fragment d'ADN cible.C'est ce qu'on appelle l'acquisition de fragments de gènes cibles.

Construction du vecteur d'expression : Dans le vecteur d'expression procaryote ou eucaryote ayant les caractéristiques de l'expression génique obtenue elle-même, le problème principal de cette étape est de construire le plasmide et le gène d'intérêt, ainsi que le système d'expression.Le temps d'expression des procaryotes est court, le coût est faible et une grande quantité d'expression est une priorité ;le gène n'est pas exprimé dans E. coli et le problème se produit dans l'optimisation des codons.En considération d'une meilleure activité et d'une meilleure purification de la protéine, les chercheurs ont choisi de l'exprimer dans la levure Pichi.L’expression réussie de l’optimisation des codons est importante.

Quelle est la méthode de purification du système de purification des protéines :

1. Précipitations.

2. Électrophorèse : Une protéine chargée est supérieure ou inférieure à son point isoélectrique et peut être déplacée vers l'électrode négative ou l'électrode positive du champ électrique dans le champ électrique.Électrophorèse sur film de support, électrophorèse, etc.

3. Dialyse : Méthode qui utilise deux sacs de dialyse pour séparer les grosses molécules des protéines et des petits composés organiques moléculaires.

4. Chromatographie : La chromatographie par échange d'ions utilise les propriétés libres des protéines.Sous un pH spécifique, les charges et les propriétés des protéines sont différentes et elles peuvent être séparées par chromatographie échangeuse d'ions.En chromatographie échangeuse d'anions, les protéines à faible pouvoir négatif sont éluées en premier.Tamis moléculaires, également appelés filtration sur gel.Les petites protéines pénètrent dans les pores et y restent longtemps.Les grosses protéines ne peuvent pas pénétrer dans les pores et s'écouler directement.

5. Quelle est la méthode de purification dusystème de purification des protéines?Ultracentrifugation : la purification des protéines peut être utilisée pour déterminer le poids moléculaire et peut être utilisée comme protéine.La formation de protéines de densités différentes est séparée.