Hver er hreinsunaraðferðinpróteinhreinsunarkerfi?Nauðsynlegt er að þekkja kóða DNA röð hreinsaða próteinsins, sjá hvaða frumur eða vefir eru oftjáðir í markgeninu og hanna gena frumra til að magna upp arf mark DNA brotsins.Þetta er svokölluð öflun markgena brota.

Smíði tjáningarferju: Í dreifkjörnunga- eða heilkjörnungatjáningarferjunni með eiginleika hinnar fánu genatjáningar sjálfrar er aðalvandamálið við þetta skref að smíða plasmíðið og genið sem vekur áhuga, og tjáningarkerfið.Dreifkjarnatjáningartíminn er stuttur, kostnaðurinn er lítill og mikil tjáning er í forgangi;genið er ekki tjáð í E. coli og vandamálið á sér stað í codon optimization.Með hliðsjón af betri virkni og hreinsun próteins völdu vísindamennirnir að tjá í Pichi geri.Árangursrík tjáning codon optimization er mikilvæg.

Hver er hreinsunaraðferð próteinhreinsunarkerfisins:

1. Úrkoma.

2. Rafskaut: Hlaðið prótein er hærra eða lægra en jafnrafmagnspunktur þess og hægt er að færa það yfir á neikvæða rafskautið eða jákvæða rafskaut rafsviðsins í rafsviðinu.Stuðningur við filmu rafdrætti, rafskaut osfrv.

3. Skilun: Aðferð sem notar tvo skilunarpoka til að skilja stórar sameindir frá próteinum og litlum sameindalífrænum efnasamböndum.

4. Litskiljun: Jónaskiptaskiljun notar frjálsa eiginleika próteina.Við ákveðið pH eru hleðslur og eiginleikar próteina mismunandi og hægt er að aðskilja þau með jónaskiptaskiljun.Í anjónaskiptaskiljun eru prótein með lágan neikvæðan kraft skoluð út fyrst.Sameindasigti, einnig þekkt sem hlaupsíun.Lítil prótein komast inn í svitaholurnar og dvelja í þeim í langan tíma.Stór prótein komast ekki inn í svitaholurnar og flæða beint út.

5. Hver er hreinsunaraðferðinpróteinhreinsunarkerfi?Ofskilvinding: Hægt er að nota próteinhreinsun til að ákvarða mólþunga og er hægt að nota sem prótein.Myndun próteina með mismunandi þéttleika er aðskilin.