Aký je spôsob čisteniasystém čistenia bielkovín?Je potrebné poznať kódujúcu sekvenciu DNA purifikovaného proteínu, vidieť, ktoré bunky alebo tkanivá sú nadmerne exprimované v cieľovom géne, a navrhnúť génové priméry na amplifikáciu arf cieľového fragmentu DNA.Ide o takzvané získavanie cieľových génových fragmentov.

Konštrukcia expresného vektora: V prokaryotickom alebo eukaryotickom expresnom vektore s charakteristikami samotnej získanej génovej expresie je hlavným problémom tohto kroku konštrukcia plazmidu a požadovaného génu a expresného systému.Čas prokaryotickej expresie je krátky, náklady sú nízke a prioritou je veľké množstvo expresie;gén nie je exprimovaný v E. coli a problém nastáva pri optimalizácii kodónov.Vzhľadom na lepšiu aktivitu a čistenie proteínu sa výskumníci rozhodli exprimovať v kvasinkách Pichi.Úspešná expresia optimalizácie kodónov je dôležitá.

Aká je metóda čistenia proteínového purifikačného systému:

1. Zrážky.

2. Elektroforéza: Nabitý proteín je vyšší alebo nižší ako jeho izoelektrický bod a môže byť presunutý na zápornú alebo kladnú elektródu elektrického poľa v elektrickom poli.Podpora filmovej elektroforézy, elektroforézy atď.

3. Dialýza: Metóda, ktorá využíva dva dialyzačné vaky na oddelenie veľkých molekúl od bielkovín a malých molekulárnych organických zlúčenín.

4. Chromatografia: Iónomeničová chromatografia využíva voľné vlastnosti proteínov.Pri špecifickom pH sú náboje a vlastnosti proteínov rôzne a možno ich oddeliť iónomeničovou chromatografiou.Pri aniónovej výmennej chromatografii sa najskôr eluujú proteíny s nízkou zápornou silou.Molekulové sitá, tiež známe ako gélová filtrácia.Malé bielkoviny vstupujú do pórov a zostávajú v nich dlho.Veľké bielkoviny nemôžu vstúpiť do pórov a vytekať priamo.

5. Aký je spôsob čisteniasystém čistenia bielkovín?Ultracentrifugácia: Purifikácia proteínu sa môže použiť na stanovenie molekulovej hmotnosti a môže sa použiť ako proteín.Oddeľuje sa tvorba proteínov s rôznou hustotou.