Cila është metoda e pastrimit të sistemit të pastrimit të proteinave

Cila është metoda e pastrimit tësistemi i pastrimit të proteinave?Është e nevojshme të dihet sekuenca e ADN-së koduese e proteinës së pastruar, për të parë se cilat qeliza ose inde janë të mbishprehura në gjenin e synuar dhe për të hartuar primerë të gjeneve për të amplifikuar arf-në e fragmentit të ADN-së së synuar.Ky është i ashtuquajturi përvetësimi i fragmenteve të gjenit të synuar.

Ndërtimi i vektorit të shprehjes: Në vektorin e shprehjes prokariote ose eukariote me karakteristikat e vetë shprehjes së gjenit të përftuar, problemi kryesor i këtij hapi është ndërtimi i plazmidit dhe gjenit me interes dhe sistemit të shprehjes.Koha e shprehjes prokariotike është e shkurtër, kostoja është e ulët dhe një sasi e madhe shprehjeje është prioritet;gjeni nuk shprehet në E. coli dhe problemi shfaqet në optimizimin e kodonit.Duke pasur parasysh aktivitetin më të mirë dhe pastrimin e proteinës, studiuesit zgjodhën të shpreheshin në maja Pichi.Shprehja e suksesshme e optimizimit të kodonit është e rëndësishme.

19

Cila është metoda e pastrimit të sistemit të pastrimit të proteinave:

1. Reshjet.

2. Elektroforeza: Një proteinë e ngarkuar është më e lartë ose më e ulët se pika e saj izoelektrike dhe mund të zhvendoset në elektrodën negative ose në elektrodën pozitive të fushës elektrike në fushën elektrike.Elektroforeza mbështetëse e filmit, elektroforeza, etj.

3. Dializa: Një metodë që përdor dy thasë dializë për të ndarë molekulat e mëdha nga proteinat dhe përbërjet organike të vogla molekulare.

4. Kromatografia: Kromatografia e shkëmbimit të joneve përdor vetitë e lira të proteinave.Nën një pH specifik, ngarkesat dhe vetitë e proteinave janë të ndryshme dhe ato mund të ndahen me kromatografi të shkëmbimit të joneve.Në kromatografinë e shkëmbimit të anionit, së pari eliminohen proteinat me fuqi të ulët negative.Sitë molekulare, të njohura edhe si filtrim xhel.Proteinat e vogla hyjnë në poret dhe qëndrojnë në to për një kohë të gjatë.Proteinat e mëdha nuk mund të hyjnë në poret dhe të rrjedhin drejtpërdrejt.

5. Cila është metoda e pastrimit tësistemi i pastrimit të proteinave?Ultracentrifugimi: Pastrimi i proteinave mund të përdoret për të përcaktuar peshën molekulare dhe mund të përdoret si proteinë.Ndahet formimi i proteinave me dendësi të ndryshme.


Koha e postimit: 21 Prill 2021