Qual è il metodo di purificazione delsistema di purificazione delle proteine?È necessario conoscere la sequenza di DNA codificante della proteina purificata, vedere quali cellule o tessuti sono sovraespressi nel gene bersaglio e progettare primer genici per amplificare l'arf del frammento di DNA bersaglio.Questa è la cosiddetta acquisizione di frammenti del gene bersaglio.

Costruzione del vettore di espressione: Nel vettore di espressione procariotico o eucariotico con le caratteristiche dell'espressione genica stessa ottenuta, il problema principale di questa fase è costruire il plasmide e il gene di interesse, e il sistema di espressione.Il tempo di espressione procariotico è breve, il costo è basso e una grande quantità di espressione è una priorità;il gene non è espresso in E. coli e il problema si verifica nell'ottimizzazione del codone.In considerazione di una migliore attività e purificazione della proteina, i ricercatori hanno scelto di esprimerla nel lievito Pichi.L'espressione riuscita dell'ottimizzazione del codone è importante.

Qual è il metodo di purificazione del sistema di purificazione delle proteine:

1. Precipitazioni.

2. Elettroforesi: una proteina carica è più alta o più bassa del suo punto isoelettrico e può essere spostata sull'elettrodo negativo o sull'elettrodo positivo del campo elettrico nel campo elettrico.Supporta l'elettroforesi su pellicola, l'elettroforesi, ecc.

3. Dialisi: un metodo che utilizza due sacche da dialisi per separare le grandi molecole dalle proteine ​​e dai piccoli composti organici molecolari.

4. Cromatografia: la cromatografia a scambio ionico utilizza le proprietà libere delle proteine.Sotto un pH specifico, le cariche e le proprietà delle proteine ​​sono diverse e possono essere separate mediante cromatografia a scambio ionico.Nella cromatografia a scambio anionico, le proteine ​​con basso potere negativo vengono eluite per prime.Setacci molecolari, noti anche come filtrazione su gel.Piccole proteine ​​entrano nei pori e vi rimangono a lungo.Le proteine ​​di grandi dimensioni non possono entrare nei pori e fuoriuscire direttamente.

5. Qual è il metodo di purificazione delsistema di purificazione delle proteine?Ultracentrifugazione: la purificazione delle proteine ​​può essere utilizzata per determinare il peso molecolare e può essere utilizzata come proteina.La formazione di proteine ​​con densità diverse è separata.