Што такое метад ачысткісістэма ачысткі бялку?Неабходна ведаць кадзіруючую паслядоўнасць ДНК вычышчанага бялку, каб убачыць, у якіх клетках або тканінах назіраецца залішняя экспрэсія ў гене-мішэні, і распрацаваць генныя праймеры для ампліфікацыі arf фрагмента ДНК-мішэні.Гэта так званае набыццё фрагментаў гена-мішэні.

Канструяванне вектара экспрэсіі: у пракарыётычным або эукарыётычным вектары экспрэсіі з характарыстыкамі атрыманай экспрэсіі самога гена галоўная праблема гэтага этапу заключаецца ў канструяванні плазміды і цікавага гена, а таксама сістэмы экспрэсіі.Час экспрэсіі пракарыётаў кароткі, кошт нізкі, і вялікая колькасць экспрэсіі з'яўляецца прыярытэтам;ген не экспрессируется ў E. coli, і праблема ўзнікае ў аптымізацыі кодона.Улічваючы лепшую актыўнасць і ачыстку бялку, даследчыкі вырашылі экспрэсаваць у дрожджах Pichi.Паспяховая экспрэсія аптымізацыі кодона важная.

Які метад ачысткі сістэмы ачысткі бялку:

1. Ападкі.

2. Электрафарэз: зараджаны бялок знаходзіцца вышэй або ніжэй за сваю ізаэлектрычную кропку і можа быць перамешчаны на адмоўны або станоўчы электрод электрычнага поля ў электрычным полі.Падтрымка плёнкавага электрафарэзу, электрафарэзу і г.д.

3. Дыяліз: метад, які выкарыстоўвае два дыялізных мяшка для аддзялення вялікіх малекул ад бялкоў і маламалекулярных арганічных злучэнняў.

4. Храматаграфія: іонаабменная храматаграфія выкарыстоўвае свабодныя ўласцівасці бялкоў.Пры пэўным pH зарады і ўласцівасці бялкоў розныя, і іх можна падзяліць з дапамогай іонаабменнай храматаграфіі.Пры анионообменной храматаграфіі першымі элюируются вавёркі з нізкай адмоўнай здольнасцю.Малекулярныя сіты, таксама вядомыя як гель-фільтрацыя.Дробныя вавёркі трапляюць у пары і надоўга ў іх застаюцца.Вялікія вавёркі не могуць патрапіць у пары і выцякаць наўпрост.

5. Што такое метад ачысткісістэма ачысткі бялку?Ультрацэнтрыфугаванне: ачыстка бялку можа быць выкарыстана для вызначэння малекулярнай масы і можа выкарыстоўвацца ў якасці бялку.Аддзяляецца адукацыя бялкоў з рознай шчыльнасцю.