Wat is de zuiveringsmethode van deeiwitzuiveringssysteem?Het is noodzakelijk om de coderende DNA-sequentie van het gezuiverde eiwit te kennen, om te zien welke cellen of weefsels tot overexpressie komen in het doelgen, en om genprimers te ontwerpen om de arf van het doel-DNA-fragment te amplificeren.Dit is de zogenaamde verwerving van doelgenfragmenten.

Constructie van expressievector: In de prokaryotische of eukaryote expressievector met de kenmerken van de verkregen genexpressie zelf, is het belangrijkste probleem van deze stap het construeren van het plasmide en het gen van interesse, en het expressiesysteem.De prokaryote expressietijd is kort, de kosten zijn laag en een grote hoeveelheid expressie is een prioriteit;het gen komt niet tot expressie in E. coli, en het probleem doet zich voor bij codonoptimalisatie.Met het oog op een betere activiteit en zuivering van het eiwit kozen de onderzoekers ervoor om het tot expressie te brengen in Pichi-gist.Succesvolle expressie van codonoptimalisatie is belangrijk.

Wat is de zuiveringsmethode van het eiwitzuiveringssysteem:

1. Neerslag.

2. Elektroforese: Een geladen eiwit is hoger of lager dan zijn iso-elektrische punt en kan naar de negatieve elektrode of de positieve elektrode van het elektrische veld in het elektrische veld worden verplaatst.Ondersteuning van filmelektroforese, elektroforese, enz.

3. Dialyse: Een methode waarbij twee dialysezakken worden gebruikt om grote moleculen te scheiden van eiwitten en kleine moleculaire organische verbindingen.

4. Chromatografie: Ionenuitwisselingschromatografie maakt gebruik van de vrije eigenschappen van eiwitten.Bij een specifieke pH zijn de ladingen en eigenschappen van eiwitten verschillend en kunnen ze worden gescheiden door middel van ionenuitwisselingschromatografie.Bij anionenuitwisselingschromatografie worden eiwitten met een laag negatief vermogen eerst geëlueerd.Moleculaire zeven, ook wel gelfiltratie genoemd.Kleine eiwitten dringen de poriën binnen en blijven daar lange tijd zitten.Grote eiwitten kunnen de poriën niet binnendringen en stromen direct naar buiten.

5. Wat is de zuiveringsmethode van deeiwitzuiveringssysteem?Ultracentrifugatie: Eiwitzuivering kan worden gebruikt om het molecuulgewicht te bepalen en kan als eiwit worden gebruikt.De vorming van eiwitten met verschillende dichtheden is gescheiden.