តើអ្វីជាវិធីសាស្រ្តនៃការបន្សុតប្រព័ន្ធបន្សុតប្រូតេអ៊ីន?វាចាំបាច់ក្នុងការដឹងពីការសរសេរកូដ DNA នៃប្រូតេអ៊ីនដែលបានបន្សុត ដើម្បីមើលថាតើកោសិកា ឬជាលិកាណាមួយត្រូវបានបញ្ចេញលើសក្នុងហ្សែនគោលដៅ និងដើម្បីរចនាហ្សែន primers ដើម្បីពង្រីក arf នៃបំណែក DNA គោលដៅ។នេះ​ជា​អ្វី​ដែល​ហៅ​ថា​ការ​ទទួល​បាន​បំណែក​ហ្សែន​គោលដៅ។

ការស្ថាបនាវ៉ិចទ័រកន្សោម៖ នៅក្នុងវ៉ិចទ័រកន្សោម prokaryotic ឬ eukaryotic ជាមួយនឹងលក្ខណៈនៃកន្សោមហ្សែនដែលទទួលបានដោយខ្លួនវា បញ្ហាចម្បងនៃជំហាននេះគឺការសាងសង់ plasmid និងហ្សែនចំណាប់អារម្មណ៍ និងប្រព័ន្ធបញ្ចេញមតិ។ពេលវេលាបញ្ចេញមតិ prokaryotic គឺខ្លី ការចំណាយទាប ហើយចំនួនច្រើននៃការបញ្ចេញមតិគឺជាអាទិភាព។ហ្សែនមិនត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុង E. coli ហើយបញ្ហាកើតឡើងនៅក្នុងការបង្កើនប្រសិទ្ធភាព codon ។ដោយពិចារណាលើសកម្មភាពប្រសើរជាងមុន និងការបន្សុតប្រូតេអ៊ីន អ្នកស្រាវជ្រាវបានជ្រើសរើសបង្ហាញនៅក្នុងផ្សិតភីឈី។ការបញ្ចេញមតិដោយជោគជ័យនៃការបង្កើនប្រសិទ្ធភាព codon គឺមានសារៈសំខាន់។

តើអ្វីជាវិធីសាស្រ្តបន្សុតនៃប្រព័ន្ធបន្សុតប្រូតេអ៊ីន៖

1. ទឹកភ្លៀង។

2. Electrophoresis: ប្រូតេអ៊ីនដែលមានបន្ទុកគឺខ្ពស់ជាងឬទាបជាងចំនុច isoelectric របស់វា ហើយអាចផ្លាស់ទីទៅអេឡិចត្រូតអវិជ្ជមាន ឬអេឡិចត្រូតវិជ្ជមាននៃវាលអគ្គីសនីនៅក្នុងវាលអគ្គីសនី។គាំទ្រខ្សែភាពយន្ត electrophoresis, electrophoresis ជាដើម។

3. ការលាងឈាម៖ ជាវិធីសាស្រ្តដែលប្រើថង់លាងឈាមពីរដើម្បីបំបែកម៉ូលេគុលធំពីប្រូតេអ៊ីន និងសមាសធាតុសរីរាង្គម៉ូលេគុលតូច។

4. Chromatography: ការផ្លាស់ប្តូរអ៊ីយ៉ុង chromatography ប្រើលក្ខណៈសម្បត្តិឥតគិតថ្លៃនៃប្រូតេអ៊ីន។នៅក្រោម pH ជាក់លាក់មួយ ការចោទប្រកាន់ និងលក្ខណៈសម្បត្តិនៃប្រូតេអ៊ីនគឺខុសគ្នា ហើយពួកវាអាចត្រូវបានបំបែកដោយ ion exchange chromatography ។នៅក្នុង chromatography ការផ្លាស់ប្តូរ anion ប្រូតេអ៊ីនដែលមានថាមពលអវិជ្ជមានទាបត្រូវបានដកចេញជាមុនសិន។Sieves ម៉ូលេគុល ត្រូវបានគេស្គាល់ផងដែរថាជា gel filtration ។ប្រូតេអ៊ីនតូចៗចូលទៅក្នុងរន្ធញើសហើយស្ថិតនៅក្នុងពួកវាក្នុងរយៈពេលយូរ។ប្រូតេអ៊ីនធំមិនអាចចូលទៅក្នុងរន្ធញើស និងហូរចេញដោយផ្ទាល់បានទេ។

5. តើអ្វីជាវិធីសាស្រ្តបន្សុតរបស់អេប្រព័ន្ធបន្សុតប្រូតេអ៊ីន?Ultracentrifugation: ការបន្សុតប្រូតេអ៊ីនអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីកំណត់ទម្ងន់ម៉ូលេគុលនិងអាចត្រូវបានប្រើជាប្រូតេអ៊ីន។ការបង្កើតប្រូតេអ៊ីនដែលមានដង់ស៊ីតេខុសៗគ្នាត្រូវបានបំបែក។