Zein da arazteko metodoaproteinak arazteko sistema?Beharrezkoa da araztutako proteinaren DNA-sekuentzia kodetzailea ezagutzea, xede-genean zein zelula edo ehun dauden gainespresatzen den ikusteko eta gene-abiarazleak diseinatzea xede-DNA zatiaren arf-a anplifikatzeko.Xede gene-zatiak eskuratzea deritzona da.
Adierazpen-bektorearen eraikuntza: Lortutako gene-adierazpenaren beraren ezaugarriak dituen adierazpen-bektore prokarioto edo eukariotoan, urrats honen arazo nagusia plasmidoa eta interes-genea, eta adierazpen-sistema eraikitzea da.Adierazpen prokariotoaren denbora laburra da, kostua baxua eta espresio kopuru handia lehentasuna da;genea ez da E. coli-n adierazten, eta arazoa kodoien optimizazioan gertatzen da.Proteinaren jarduera eta arazketa hobea kontuan hartuta, ikertzaileek Pichi legamian adieraztea aukeratu zuten.Kodoiaren optimizazioaren adierazpen arrakastatsua garrantzitsua da.
Zein da proteinak arazteko sistemaren arazteko metodoa:
1. Prezipitazioak.
2. Elektroforesia: Kargatutako proteina bat bere puntu isoelektrikoa baino altuagoa edo baxuagoa da eta eremu elektrikoko elektrodo negatibora edo eremu elektrikoko elektrodo positiora eraman daiteke.Laguntza film elektroforesia, elektroforesia, etab.
3. Dialisia: molekula handiak proteinetatik eta konposatu organiko molekular txikietatik bereizteko bi dialisi-poltsa erabiltzen dituen metodoa.
4. Kromatografia: Ioi-trukearen kromatografiak proteinen propietate askeak erabiltzen ditu.pH zehatz batean, proteinen kargak eta propietateak desberdinak dira, eta ioi-truke kromatografia bidez bereiz daitezke.Anion truke kromatografian, potentzia negatibo txikia duten proteinak eluitzen dira lehenik.Bahe molekularrak, gel-iragazkia bezala ere ezagunak.Proteina txikiak poroetan sartzen dira eta denbora luzez geratzen dira.Proteina handiak ezin dira poroetan sartu eta zuzenean irten.
5. Zein da arazte-metodoaproteinak arazteko sistema?Ultrazentrifazioa: Proteinen arazketa erabil daiteke pisu molekularra zehazteko eta proteina gisa erabil daiteke.Dentsitate ezberdineko proteinen eraketa bereizten da.
Argitalpenaren ordua: 2021-04-21