को शुद्धिकरण विधि के होप्रोटीन शुद्धीकरण प्रणाली?शुद्ध प्रोटिनको कोडिङ डीएनए अनुक्रम जान्न आवश्यक छ, लक्ष्य जीनमा कुन कोशिका वा तन्तुहरू ओभरएक्सप्रेस गरिएको छ भनेर हेर्न, र लक्ष्य डीएनए टुक्राको एआरएफ विस्तार गर्न जीन प्राइमरहरू डिजाइन गर्न आवश्यक छ।यो लक्ष्य जीन टुक्राहरूको तथाकथित अधिग्रहण हो।

अभिव्यक्ति भेक्टरको निर्माण: प्रोकारियोटिक वा युकेरियोटिक अभिव्यक्ति भेक्टरमा प्राप्त जीन अभिव्यक्तिको विशेषताहरू सहित, यस चरणको मुख्य समस्या प्लाज्मिड र रुचिको जीन, र अभिव्यक्ति प्रणाली निर्माण गर्नु हो।प्रोकारियोटिक अभिव्यक्ति समय छोटो छ, लागत कम छ, र अभिव्यक्तिको ठूलो मात्रा प्राथमिकता हो;जीन ई. कोलाई मा व्यक्त गरिएको छैन, र समस्या कोडोन अनुकूलन मा हुन्छ।राम्रो गतिविधि र प्रोटीन को शुद्धीकरण को विचार मा, शोधकर्ताहरु Pichi खमीर मा व्यक्त गर्न रोजे।कोडोन अनुकूलनको सफल अभिव्यक्ति महत्त्वपूर्ण छ।

प्रोटिन शुद्धिकरण प्रणाली को शुद्धिकरण विधि के हो:

1. वर्षा।

2. इलेक्ट्रोफोरेसिस: चार्ज गरिएको प्रोटिन यसको आइसोइलेक्ट्रिक बिन्दु भन्दा माथि वा कम हुन्छ र नकारात्मक इलेक्ट्रोड वा विद्युतीय क्षेत्रमा विद्युतीय क्षेत्रको सकारात्मक इलेक्ट्रोडमा सार्न सकिन्छ।समर्थन फिल्म इलेक्ट्रोफोरेसिस, इलेक्ट्रोफोरेसिस, आदि।

3. डायलाइसिस: एक विधि जसले प्रोटीन र सानो आणविक जैविक यौगिकहरूबाट ठूला अणुहरूलाई अलग गर्न दुईवटा डायलिसिस झोलाहरू प्रयोग गर्दछ।

4. क्रोमेटोग्राफी: आयन एक्सचेन्ज क्रोमाटोग्राफीले प्रोटिनहरूको मुक्त गुणहरू प्रयोग गर्दछ।एक विशिष्ट pH अन्तर्गत, प्रोटीनहरूको शुल्क र गुणहरू फरक हुन्छन्, र तिनीहरू आयन एक्सचेंज क्रोमेटोग्राफीद्वारा अलग गर्न सकिन्छ।आयन एक्सचेन्ज क्रोमेटोग्राफीमा, कम नकारात्मक शक्ति भएका प्रोटिनहरू पहिले एल्युट हुन्छन्।आणविक sieves, जेल निस्पंदन पनि भनिन्छ।साना प्रोटिनहरू छिद्रहरूमा प्रवेश गर्छन् र लामो समयसम्म रहन्छन्।ठूला प्रोटिनहरू छिद्रहरूमा प्रवेश गर्न र सीधै बाहिर निस्कन सक्दैनन्।

5. को शुद्धिकरण विधि के होप्रोटीन शुद्धीकरण प्रणाली?Ultracentrifugation: प्रोटीन शुद्धीकरण आणविक वजन निर्धारण गर्न प्रयोग गर्न सकिन्छ र प्रोटीन रूपमा प्रयोग गर्न सकिन्छ।विभिन्न घनत्वहरु संग प्रोटीन को गठन अलग छ।