Koja je metoda pročišćavanja sustava za pročišćavanje proteina

Koja je metoda pročišćavanjasustav za pročišćavanje proteina?Potrebno je znati kodirajuću sekvencu DNA pročišćenog proteina, vidjeti koje su stanice ili tkiva prekomjerno eksprimirane u ciljnom genu i dizajnirati genske početnice za pojačanje arf ciljnog fragmenta DNA.To je takozvano stjecanje fragmenata ciljnog gena.

Konstrukcija ekspresijskog vektora: U prokariotskom ili eukariotskom ekspresijskom vektoru sa karakteristikama same dobivene ekspresije gena, glavni problem ovog koraka je konstruirati plazmid i gen od interesa, te ekspresijski sustav.Vrijeme ekspresije prokariota je kratko, cijena je niska, a velika količina ekspresije je prioritet;gen nije izražen u E. coli, a problem se javlja u optimizaciji kodona.S obzirom na bolju aktivnost i pročišćavanje proteina, istraživači su odabrali ekspresiju u Pichi kvascu.Uspješna ekspresija optimizacije kodona je važna.

19

Koja je metoda pročišćavanja sustava za pročišćavanje proteina:

1. Oborine.

2. Elektroforeza: Nabijeni protein je viši ili niži od svoje izoelektrične točke i može se premjestiti na negativnu elektrodu ili pozitivnu elektrodu električnog polja u električnom polju.Podržava filmsku elektroforezu, elektroforezu itd.

3. Dijaliza: Metoda koja koristi dvije dijalizne vrećice za odvajanje velikih molekula od proteina i malih molekularnih organskih spojeva.

4. Kromatografija: kromatografija ionske izmjene koristi slobodna svojstva proteina.Pod određenim pH, naboji i svojstva proteina su različiti, a mogu se razdvojiti kromatografijom ionske izmjene.U kromatografiji anionske izmjene prvo se eluiraju proteini niske negativne moći.Molekularna sita, također poznata kao gel filtracija.Sitni proteini ulaze u pore i ostaju u njima dugo vremena.Veliki proteini ne mogu ući u pore i izravno istjecati.

5. Koja je metoda pročišćavanjasustav za pročišćavanje proteina?Ultracentrifugiranje: pročišćavanje proteina može se koristiti za određivanje molekularne težine i može se koristiti kao protein.Odvaja se stvaranje proteina različite gustoće.


Vrijeme objave: 21. travnja 2021