Arıtma yöntemi nedirprotein saflaştırma sistemi?Saflaştırılmış proteinin kodlayan DNA dizisini bilmek, hedef gende hangi hücre veya dokuların aşırı eksprese edildiğini görmek ve hedef DNA fragmanının arfını çoğaltmak için gen primerlerini tasarlamak gerekir.Buna hedef gen fragmanlarının elde edilmesi denir.

Ekspresyon vektörünün oluşturulması: Elde edilen gen ekspresyonunun özelliklerine sahip prokaryotik veya ökaryotik ekspresyon vektöründe, bu adımın ana sorunu, plazmidin, ilgilenilen genin ve ekspresyon sisteminin oluşturulmasıdır.Prokaryotik ifade süresi kısadır, maliyeti düşüktür ve büyük miktarda ifade önceliklidir;gen E. coli'de ifade edilmiyor ve kodon optimizasyonunda sorun ortaya çıkıyor.Proteinin daha iyi aktivitesi ve saflaştırılması göz önüne alındığında, araştırmacılar Pichi mayasında ifade etmeyi seçtiler.Kodon optimizasyonunun başarılı ifadesi önemlidir.

Protein saflaştırma sisteminin saflaştırma yöntemi nedir:

1. Yağış.

2. Elektroforez: Yüklü bir protein, izoelektrik noktasından daha yüksek veya daha düşük olup, elektrik alanındaki elektrik alanının negatif elektroduna veya pozitif elektroduna hareket ettirilebilir.Destek filmi elektroforezi, elektroforezi vb.

3. Diyaliz: Büyük molekülleri proteinlerden ve küçük moleküler organik bileşiklerden ayırmak için iki diyaliz torbasının kullanıldığı bir yöntem.

4. Kromatografi: İyon değişim kromatografisi proteinlerin serbest özelliklerini kullanır.Belirli bir pH altında proteinlerin yükleri ve özellikleri farklıdır ve iyon değişim kromatografisi ile ayrılabilirler.Anyon değişim kromatografisinde ilk önce düşük negatif güce sahip proteinler ayrıştırılır.Jel filtrasyonu olarak da bilinen moleküler elekler.Küçük proteinler gözeneklere girer ve uzun süre orada kalır.Büyük proteinler gözeneklere giremez ve doğrudan dışarı akamaz.

5. Saflaştırma yöntemi nedir?protein saflaştırma sistemi?Ultrasantrifüjleme: Protein saflaştırması moleküler ağırlığı belirlemek için kullanılabilir ve protein olarak kullanılabilir.Farklı yoğunluklara sahip proteinlerin oluşumu ayrılır.