Який метод очищеннясистема очищення білків?Необхідно знати кодуючу послідовність ДНК очищеного білка, щоб побачити, які клітини або тканини мають надмірну експресію в цільовому гені, і сконструювати генні праймери для ампліфікації arf цільового фрагмента ДНК.Це так зване придбання фрагментів цільового гена.

Конструювання вектора експресії: у прокаріотичному або еукаріотичному векторі експресії з характеристиками самої експресії отриманого гена основною проблемою цього етапу є конструювання плазміди та цікавого гена та системи експресії.Час прокаріотичної експресії короткий, вартість низька, і велика кількість експресії є пріоритетом;ген не експресується в E. coli, і проблема виникає в оптимізації кодону.Зважаючи на кращу активність і очищення білка, дослідники вирішили використовувати дріжджі Pichi.Успішна експресія оптимізації кодону є важливою.

Який метод очищення системи очищення білка:

1. Опади.

2. Електрофорез: заряджений білок вище або нижче своєї ізоелектричної точки і може бути переміщений до негативного електрода або позитивного електрода електричного поля в електричному полі.Опорний плівковий електрофорез, електрофорез тощо.

3. Діаліз: метод, який використовує два діалізні мішки для відділення великих молекул від білків і малих молекулярних органічних сполук.

4. Хроматографія. Іонообмінна хроматографія використовує вільні властивості білків.При певному рН заряди та властивості білків різні, і їх можна розділити за допомогою іонообмінної хроматографії.При аніонообмінній хроматографії спочатку елююють білки з низькою негативною потужністю.Молекулярні сита, також відомі як гель-фільтрація.Дрібні білки потрапляють в пори і залишаються в них надовго.Великі білки не можуть потрапити в пори і витекти безпосередньо.

5. Який метод очищеннясистема очищення білків?Ультрацентрифугування: очищення білка можна використовувати для визначення молекулярної маси та його можна використовувати як білок.Розділяється утворення білків з різною щільністю.